親和柱介紹

生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用，這些親和作用屬于生物專一性識別；此外，某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用，如染料和某些酶（特別是脫氫酶和激酶等），植物凝集素和糖蛋白，金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用，都可以應(yīng)用于親和分離過程。

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親和柱概述

#親和柱凈化法

親和柱凈化法是檢測真菌常用的樣品凈化方法之一，具有特異性強(qiáng)、回收率高、凈化效果好的特點，并且可以起到富集目標(biāo)化合物的作用。特別適用于真菌等微量、衡量物質(zhì)的回收測定。

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◆ 優(yōu)良的樣品凈化效果，可以經(jīng)受各種復(fù)雜樣品基質(zhì)的考驗；

◆ 穩(wěn)定而理想的回收率，滿足國標(biāo)、各類行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、藥典方法的使用要求；

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你對親和柱了解多少？

親和柱可以應(yīng)對不同復(fù)雜的樣品基質(zhì)，實現(xiàn)樣品中目標(biāo)的有效回收，回收率總體保持理想。

親和柱中含有特異性緊密附著在載體上，這些可以與樣品中的特異性結(jié)合，保存在親和柱中，進(jìn)一步洗脫可以得到待檢測的。適用于濃縮和純化糧食、堅果或者牛奶等復(fù)雜基質(zhì)中的樣品的提純。

主要應(yīng)用于赭曲，嘔吐和玉米赤等的提取和凈化。

親和柱——親和層析的原理

通常，在開始親和層析前需要預(yù)先進(jìn)行全細(xì)胞提取物的粗制，例如細(xì)胞裂解液，生長培養(yǎng)基。

首先將固定相裝入帶有流動相的色譜柱中，其中含有某類特定的生物大分子（從DNA到蛋白質(zhì)，取決于實驗需求）。等待一段時間使兩相充分混合，隨后將洗滌緩沖液倒入色譜柱中。洗滌緩沖液通過破壞非目標(biāo)生物分子與固定相的較弱結(jié)合來去除非目標(biāo)生物分子。目標(biāo)生物分子對固定相具有較高的親和力，因此能夠保持與固定相的結(jié)合，而不會被洗滌緩沖液沖走。然后將洗脫緩沖液倒入含有剩余目標(biāo)生物分子的色譜柱中。洗脫緩沖液比洗滌緩沖液，能夠從更大程度上減弱靶生物分子與固定相之間的相互作用，從而洗脫靶生物分子。洗脫得到的溶液包含洗脫緩沖液和目標(biāo)分子，稱為洗脫液。

固定相一般是凝膠基質(zhì)，常見的有瓊脂糖。為了防止目標(biāo)分子與配體結(jié)合過程中的空間干擾或重疊，首先將含有烴鏈的抑制連接到瓊脂糖珠（固體支持物）上。這種具有烴鏈的抑制通常被稱為瓊脂糖珠和靶分子之間的間隔基。