低溫生物菌種——菌種分離方法

組織分離法

先將所需的藥用真菌采集回來，選取新鮮、個體大、壯實(shí)、中齡及無病蟲害的子實(shí)體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實(shí)體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環(huán)菌）。再用75 %酒精進(jìn)行表面消毒2 分鐘，用無菌水（或冷開水）沖洗數(shù)次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上，置24 ～26℃溫度下，培養(yǎng)5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長有白色菌絲時，應(yīng)及時將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)或保藏。

生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)使用現(xiàn)狀

細(xì)菌類生產(chǎn)用除常見的芽孢外， 還出現(xiàn)了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環(huán)境中， 未見致病性報(bào)道， 屬風(fēng)險(xiǎn)一級； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風(fēng)險(xiǎn)一級 ， 但有從動物受傷部位分離到該菌的報(bào)道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風(fēng)險(xiǎn)二級， 建議謹(jǐn)慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進(jìn)植物生長和生物修復(fù)等功能的細(xì)菌， 但同時也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風(fēng)險(xiǎn)三級， 需做致病性試驗(yàn)， 建議慎用或不用。真菌類生產(chǎn)用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級二級， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則》 進(jìn)行毒理學(xué)測試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產(chǎn)朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級一級， 可免做毒理學(xué)試驗(yàn)。

低溫生物處理的優(yōu)勢

我國北方污水處理一直受到低溫影響，尤其氨氮處理效果差、出水難以達(dá)標(biāo)等問題的困擾。目前污水廠一般采用增加污泥濃度、水力停留時間、池體保溫加蓋等措施以提高處理效果，但投資和運(yùn)行費(fèi)用增加的問題也隨之而來。溫度降低所導(dǎo)致的生物處理效果下降，歸根結(jié)底是由于當(dāng)水溫低于15℃時，處生化系統(tǒng)中存在的低溫微生物的數(shù)量和活性不能達(dá)到常溫下中溫菌的水平，污水中的有機(jī)污染物質(zhì)不能被迅速降解所導(dǎo)致的。因此，采用投加耐低溫生物菌劑的方式對東北地區(qū)污水處理廠生化處理系統(tǒng)的耐低溫改良，對低溫快速啟動和污水處理廠污水穩(wěn)定達(dá)標(biāo)排放意義重大。

生物菌種發(fā)酵成有機(jī)肥如何操作的？

發(fā)酵肥料操作過程：

1、菌種一般用量為0.2%--0.5%。

2、原輔料及要求：主要物料：水果渣、干蔗渣、食用菌渣、酒糟、啤酒糟、糖渣、醋渣、淀粉渣、木薯渣、檸檬酸渣、醬油渣、味精渣、粉渣、豆腐渣、藥渣、油渣、油餅粕、糠麩、棉菜粕、霉變飼料、污泥、糖廠啤酒廠渣泥、屠宰下腳料、潲（泔）水、剩飯菜、人動物糞便等大宗物料。

輔料：各種農(nóng)作物秸稈、樹葉雜草、瓜藤、稻草、松殼、花生殼、鋸木屑、谷殼粉、統(tǒng)糠等干燥、粉碎、高碳即可。

3、原輔料配比：主料∶輔料=5:1-3:1。

4、水分控制在60-65%，手抓物料成團(tuán)剛好出水。

5、按要求將菌種、主料和輔料全部混合均勻

6、環(huán)境溫度15℃以上，一次堆料不少于4方，堆成寬1.5～2米、高0.6米左右、長度不限的堆，并用棍在堆內(nèi)打通氣孔。

7、堆溫升至50℃時開始翻倒，每天一次，如堆溫超過65℃，再加次翻倒。溫度控制在70℃以下，溫度太高對養(yǎng)分有影響。

8、腐熟標(biāo)志：堆溫降低，物料疏松，無物料原臭味，稍有氨味，堆內(nèi)產(chǎn)生白色菌絲。

9、腐熟的原肥：直接使用，生產(chǎn)商品有機(jī)肥、生物有機(jī)肥、有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥、生物有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥等。

注意：

①視水分多少增減配比，發(fā)酵混合物的總水分應(yīng)控制在60～65%。過高過低均不利于發(fā)酵，水過少，發(fā)酵慢；水過多會導(dǎo)致通氣差、升溫慢并產(chǎn)生臭味。水分合適與否判斷辦法：手緊抓一把物料，指縫見水印但不滴水，落地即散。

②如果按每噸添加1公斤尿素或10公斤過磷酸鈣發(fā)酵效果。