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培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能是什么原因?

發(fā)布時(shí)間:2022-09-27 09:17  

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培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁的原因可能如下:
1.支原體污染.
2.培養(yǎng)瓶瓶底不干凈.
3.培養(yǎng)液pH 值過堿(NaHCO3 分解).
4.消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過期儲(chǔ)存、儲(chǔ)存不當(dāng).
5.細(xì)胞老化(如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性).
6.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高.
建議解決方法:
1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度.
2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物.
3.注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶.
4.使用無(wú)菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無(wú)菌CO2(將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可).
5.重新配置消化液或培養(yǎng)液.
6.啟用新的保種細(xì)胞.

7.調(diào)節(jié)**接種細(xì)胞濃度.