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原位雜交試劑電話,思特進

發(fā)布時間:2021-04-27 07:38  

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多彩色熒光原位雜交技術(shù):顯而易見,是熒光原位雜交的升級版,采用多個熒光來檢測,目前的發(fā)展及運用也是較多的。

原位PCR:將原位雜交結(jié)合PCR技術(shù)發(fā)展起來的實驗方法。

基因組原位雜交技術(shù):該技術(shù)在我們的領(lǐng)域可能運用的畢竟少,主要是根據(jù)物種DNA同源性差異實現(xiàn),在農(nóng)作物等的雜交育種上運用較廣,


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。


雜交技術(shù)zui重要的因素之一是選擇zui適的雜交反應溫度。若反應溫度低于Tm 10~15℃,堿基順序高度同源的互補鏈可形成穩(wěn)定的雙鏈,錯配對減少。若反應溫度再低(Tm-30℃),雖然互補鏈之間也可形成穩(wěn)定的雙鏈,但互補堿基配對減少,錯配對增多、氫鍵結(jié)合的更弱。如兩個同源性在50%左右或更低些的DNA,調(diào)整雜交溫度可使它們之間的雜交率變化10倍,因此在實驗前必須首先確定雜交溫度。通常有三種溫度可供試驗,即zui適復性溫度、苛刻復性溫度及非苛刻復性溫度。溫度的選擇及溫度對雜交的影響見表18-3。

zui適復性溫度(Optimunm renaturation temperature, TOR):Tor =Tm –25℃

苛刻復性溫度:Ts = Tm – (10或15℃)

非苛刻復性溫度:Tns =Tm – (30或35℃)



在選用探針時經(jīng)常會受到可利用探針種類的限制。如在建立DNA文庫時,手頭沒有篩選特定基因的克0隆探針,這時就可用寡核苷酸探針來代替。但必須首先純化該基因的編碼蛋白,并測定6個以上的末端氨基酸序列,通過反推的核苷酸序列合成一套寡核苷酸探針。如果已有其它動物的同種基因克0隆,因為人類和動物間在同一基因的核苷酸順序上存在較高的同源性,因此可利用已鑒定的動物基因作探針來篩選人類基因克0隆。對于基因核苷酸序列背景清楚而無法獲得克0隆探針時,可采用PCR方法擴增某段基因序列,并克0隆人合適的質(zhì)粒載體中,即可得到自己的探針。這種方法十分簡便,無論基因組DNA探針還是cDNA探針都可以容易地獲得,而且,可以建立PCR的基因檢測方法,與探針雜交方法可作對比,可謂一舉兩得。