{微生物}培養(yǎng)

——微生物培養(yǎng)——

指將微生物接種到培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)一定條件使微生物生長(zhǎng)繁殖。4、-80℃低溫法將junzhong懸浮于保護(hù)劑中，在－80℃冰箱中保存的一種長(zhǎng)期保藏方法。接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養(yǎng)基表面。②劃線法:用接種環(huán)沾取含菌材料，在固體培養(yǎng)基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基，搖勻后冷卻凝固。④點(diǎn)植法:用接種針在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點(diǎn)。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進(jìn)入半固體深層培養(yǎng)基中。⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料，在液體培養(yǎng)基中洗下。培養(yǎng)方法則根據(jù)微生物對(duì)氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。需氧培養(yǎng)是指必須在有氧環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，必要時(shí)用振蕩或通氣攪拌達(dá)到充分供氧;厭氧培養(yǎng)是培養(yǎng)過(guò)程一直保持在少氧或無(wú)氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學(xué)、生物等辦法使培養(yǎng)容器內(nèi)的氧氣部分或全部消除。通常用抽真空方法，有時(shí)將兩種方法結(jié)合使用，使厭氧培養(yǎng)更為理想。接種、培養(yǎng)是食品微生物應(yīng)用、研究過(guò)程中基本和必不可少的方法。

{微生物檢測(cè)}微生物接種

4、澆混接種

該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中，然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的。待平板凝固之后，置合適溫度下培養(yǎng)，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落。

5、涂布接種

與澆混接種略有不同，就是先倒好平板，讓其凝固，然后再將菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作來(lái)回左右的涂布，讓菌液均勻分布，就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物的菌落。

6、液體接種

從固體培養(yǎng)基中將菌洗下，倒入液體培養(yǎng)基中，或者從液體培養(yǎng)物中，用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中，或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中，都可稱為液體接種。

7、注射接種

該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi)，如人或其它動(dòng)物中，常見(jiàn)的yimiao預(yù)防接種，就是用注射接種，接入人體，來(lái)預(yù)防某些疾病。

8、huoti接種

huoti接種是專門(mén)用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法，因?yàn)椴《颈仨毥臃N于活的生物體內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖。所用的huoti可以是整個(gè)動(dòng)物；也可以是某個(gè)離體活組織，例如猴等；也可以是發(fā)育的雞胚。接種的方式是注射，也可以是拌料喂養(yǎng)。

注：有所接種必須無(wú)菌操作

培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后，用經(jīng)過(guò)滅菌的工具(如接種針和吸管等)在無(wú)菌條件下接種含菌材料(如樣品、菌苔或菌懸液等)于培養(yǎng)基上，這個(gè)過(guò)程叫做無(wú)菌接種操作。在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中的各種接種必須是無(wú)菌操作。

(1)接種滅菌 (2)開(kāi)啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好棉塞。

抑菌效力

銅綠假單胞菌菌懸液：接種銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)；取上述培養(yǎng)物用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋至  

用比濁法制成每1ml含菌數(shù)約為108cfu。

8.2.2金黃色pt球菌菌懸液：接種金黃色pt球菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)；取上述培養(yǎng)物用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋至             ，用比濁法制成每1ml含菌數(shù)約為108cfu。

根據(jù)產(chǎn)品類型，在供試品剛接種（0時(shí)）及表2規(guī)定的間隔時(shí)間，分別從上述每個(gè)容器中取供試品1ml（g），用PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液稀釋成1:10、1:102、1：103等稀釋級(jí)。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)從2個(gè)以上最xiao包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑還不得少于4片。采用平皿法（照附錄Ⅺ J微生物限度檢查法，其中測(cè)定細(xì)菌用胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基，測(cè)定真菌用沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）測(cè)定每份供試品中所含的菌數(shù)。

8.6.2根據(jù)菌數(shù)測(cè)定結(jié)果，計(jì)算1ml(g)供試品各試驗(yàn)菌所加的菌數(shù)及各間隔時(shí)間的菌數(shù)，并換算成lg值。