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發(fā)布時(shí)間:2021-03-24 02:10  
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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。氰丙基SPE柱規(guī)格
為何在 SPE操作中會(huì)出現(xiàn)流速非常慢或流速不一致,回收率較低,且平行性差?也許很多小伙伴都遇到過(guò)這樣的問(wèn)題。小子選錯(cuò)了,方法有問(wèn)題嗎?或者填充材料的粒度分布不均勻,填充松緊度不穩(wěn)定?實(shí)際上 SPE小柱每批流速都有嚴(yán)格的質(zhì)量控制范圍,在質(zhì)量控制范圍內(nèi)的小柱可以保證穩(wěn)定的流速,超出質(zhì)量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么,是否可以采用一種穩(wěn)定的方法,用出廠流速測(cè)試合格
實(shí)際上還有一個(gè)很容易被大家忽視的細(xì)節(jié)也會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)速度過(guò)慢: SPE小柱在運(yùn)輸過(guò)程中篩板和填料可能會(huì)發(fā)生微小的松動(dòng),導(dǎo)致空氣進(jìn)入填料(一般不容易被肉眼看到),含氣填料在氣壓下會(huì)導(dǎo)致溶劑流動(dòng)緩慢。這一點(diǎn)大家都能理解,為什么同一批小柱子會(huì)出現(xiàn)流速不平衡的情況
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正壓除氣泡
試樣數(shù)量較少,填充量較小,人工施加正壓較為方便,可采用針筒連接接頭法進(jìn)行正壓排除氣泡。
□負(fù)壓排泡
試樣量較大,填料量大,人工施加正壓不便,可用真空泵連接固相萃取裝置,負(fù)壓排出氣泡。
1.2排氣泡的時(shí)間?
在 SPE操作中,一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個(gè)步驟都需要一個(gè)排氣泡?但是,一般情況下,當(dāng)填料之間有空隙時(shí),需要排出氣泡,例如,當(dāng)平衡液被激1活后,需要排出氣泡,使溶液能更好地與填料接觸。
另外還有一個(gè)容易忽略的環(huán)節(jié)也是需要排出氣泡的,一般淋洗后需要進(jìn)行抽干操作,抽干后填料間也會(huì)有空氣進(jìn)入,加入洗脫液后,也是要排出氣泡的,否則大量的氣泡也會(huì)嚴(yán)重影響洗脫液的流速和洗脫效果。
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通常用 mg/ml來(lái)表示固相萃取小柱的規(guī)格,其中 mg/ml表示填充物重量,填充物上一次可容納的zui大溶液體積。
淋洗容量通常是填充床容量的2-5倍。
吸收量:硅膠基質(zhì)填料可吸附的很大吸收量和干擾量,一般不超過(guò)填料重量的5%;
所能吸附的聚合物基質(zhì)填料zui大重量,一般不超過(guò)填料重量的10-15%。
所以在選擇固相萃取小柱規(guī)格時(shí),首先要估計(jì)好被吸附物和干擾物的重量,然后去換算就知道應(yīng)該選擇什么規(guī)格更合適了!
例如, waters oasis HLB 30 cc/60 mg,這是一種高分子填充物,它可以吸附10-15%-60 mg的被測(cè)物質(zhì)和干擾物重量=6-9 mg。
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圓柱形容積
對(duì)同一種填料產(chǎn)品,在填料量一定的情況下,采用較小的柱管體積,流動(dòng)較慢。由于圓柱體體積越小,橫截面越小,填充高度越高,流動(dòng)相阻力就越大,從而使流速變慢。因此,在實(shí)際檢測(cè)工作中,如果對(duì)上樣量和上樣流速有要求,在不影響固相萃取效果的情況下,可選用大體積積柱管或大通量膜片裝置, CNW的 DISK盤片上樣速度可達(dá)50 ml/min,在處理大型水樣時(shí)具有明顯的流速優(yōu)勢(shì)。
溶液的選擇與使用
許多教師在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中很容易忽略溶劑的選擇,如:C18小柱,一般用甲1醇活化,若用水活化,由于C18的疏水性,水的浸潤(rùn)速度會(huì)比甲1醇慢,導(dǎo)致流動(dòng)速度變慢。遇有此情況,調(diào)整活化溶劑即可解決。
SPE技術(shù)分離效率較低,主要用于處理樣品。借助于 SPE測(cè)試技術(shù),可實(shí)現(xiàn)以下目標(biāo):將干擾后續(xù)分析的物質(zhì)去除;富集微量組分,提高分析靈敏度;將試樣溶劑變換,使其與分析方法匹配;原位衍生;試樣脫鹽;試樣存儲(chǔ)和運(yùn)輸方便。
固相電柱:填料粒徑不同于 HLPC柱,其它部分相同。用得很多的是C18。該填料具有很強(qiáng)的疏水性,在水相中保留了大部分有機(jī)物質(zhì);同時(shí)使用了其它具有不同選擇性和保留性的材料。SPE相中含有活性基團(tuán)或活性化合物,可用來(lái)分析衍生化反應(yīng)。防腐板:非常類似于膜過(guò)濾器。盤狀萃取器是 PTFE片狀填料或裝有填料的玻璃鋼片狀填料;填料占 SPE片狀總填料的60%~90%,片狀盤厚約1 mm。與前一種不同的是床層厚度/直徑比(L/d)。適用于富集水中微量污染物。
固相微萃取是一種新的樣品預(yù)處理和濃縮技術(shù),屬于選擇性非溶劑萃取方法。固相微萃取是近幾年來(lái)國(guó)際上興起的一種樣品分析前處理技術(shù),是在固相萃取的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,它保留了所有的優(yōu)點(diǎn),摒棄了用柱狀填料和用溶劑來(lái)解吸的弊端,只需一個(gè)類似進(jìn)樣器的固相微萃取裝置就可以完成全部的前處理和進(jìn)樣工作。
固相微萃取主要是對(duì)有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行分析,根據(jù)有機(jī)物質(zhì)和溶劑“相似者相溶”的原理,利用石英纖維表面的色譜固定相對(duì)分析組分的吸附作用,從樣品基質(zhì)中萃取組分,逐步富集,完成樣品前處理過(guò)程。進(jìn)樣時(shí),采用高溫氣相色譜進(jìn)樣器,采用液相色譜、毛細(xì)管電泳等流動(dòng)相將吸附組分從固定相解吸出來(lái),用色譜儀分析。
1.在全球市場(chǎng)上,2018年全球色譜柱產(chǎn)量為3785.7千根,比2013年的3096.5千根有所增加,由美國(guó)主導(dǎo),占全球色譜柱產(chǎn)量的45.90%。作為第二大區(qū)域市場(chǎng)的歐洲,占全球產(chǎn)量的24.23%。現(xiàn)在主要的色譜柱生產(chǎn)商集中在安捷倫公司,沃特世公司,島津公司,世1界領(lǐng)1先的 ThermoFisher公司,它在2018年的市場(chǎng)占有率為22.01%,位居di一。
2.美國(guó)是色譜柱消費(fèi)zui多的地區(qū),2018年1448.7千根色譜柱的消費(fèi)量占全球的38.27%,其次是歐洲的29.78%。
三、色譜柱可分為氣相色譜柱、液相色譜柱和 SPE固相萃取小柱,在全球范圍內(nèi),液相色譜柱的產(chǎn)量占很大比例,2018年為2494千根,占65.88%。其中,氣相色譜柱的產(chǎn)量占24.74%, SPE固相萃取柱的產(chǎn)量占9.38%。
SPE檢測(cè)方法獨(dú)立于分析方法, SPE檢測(cè)方法僅供后續(xù)分析使用。二、為了使樣品溶液與填料充分接觸,溶劑流量不得過(guò)大。三、可以用自動(dòng)化儀器來(lái)完成。該儀器主要由柱架、柱塞泵、貯液槽、管道和處理樣品的處理機(jī)組成。預(yù)柱處理目的:1.去除可能存在于填料中的雜質(zhì);2.使填料溶出,提高固相萃取的可再生性
建立 SPE方法1.為了防止分析物損失,樣品中的溶劑濃度不宜過(guò)高;2.采用反相萃取法,樣品用水或緩沖劑作溶劑,其中有機(jī)溶1劑含量不超過(guò)10%;3.為克服加樣過(guò)程中分析物損失的問(wèn)題,可采用弱溶劑稀釋樣品,減少樣品體積,增加 SPE柱中的填料,并選擇對(duì)分析物保留較強(qiáng)的吸附劑等措施。