液相色譜儀

根據(jù)應(yīng)用方向可以分為制備、半制備、分析等類型，使用前兩種的應(yīng)用都是為了制備樣品，而后一種則是為了分析樣品，做定性定量實驗。它們在原理上相同，卻也有著各自的區(qū)別，現(xiàn)在對前兩類液相色譜儀進(jìn)行比較。

都是制備型儀器，制備、半制備液相色譜儀針對的樣品量和分離速度不同，半制備分離純化的樣品量少，由于泵的壓力和流速會低一些，分離效率會相對低一些。但它在純化小樣和分離微量元素方面有很大用途。制備型儀器可以用在生產(chǎn)中，比如食品原料中農(nóng)殘去處，藥品生產(chǎn)中去除無效成分或有毒成分等。半制備型儀器更多用在實驗中，它經(jīng)常和全自動固相萃取儀搭配使用來更大程度純化樣品。由于泵的功率不同，儀器中各個部分的尺寸和材質(zhì)也略有不同，半制備型儀器中各部分需要承受的壓力較小，處理樣品量少，所以從色譜柱到管道、閥門等通量都較小，而制備型儀器就要大一些以應(yīng)對較大量的樣品進(jìn)入。操作方面基本一致，除了尺寸外沒有什么其它實質(zhì)區(qū)別。

液相色譜特點(diǎn)

①高壓：流動相為液體，流經(jīng)色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。

②高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時。

③高：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

④高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。

⑤應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢。

⑥柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物

⑦樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。此外液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長，相互補(bǔ)充。液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

液相色譜儀在食品檢測中的應(yīng)用

　實際的食品安全檢測中，液相色譜儀更加適應(yīng)對沸點(diǎn)高、熱穩(wěn)定性較差、分子量較高物體的測試。

　　1、N-亞的測定

　　在臘肉等腌制食品中，生產(chǎn)主體經(jīng)常會添加或者亞作為腌制食品的發(fā)色劑，本身并不存在嚴(yán)重的危害，但是如果其添加的量過大，在還原作用的影響下肉制品中會生成N-亞，而N-亞對人體的危害較大，長期攝入會導(dǎo)致和結(jié)等疾病。針對N-亞的傳統(tǒng)測量方法是氣相色譜法，這種方法只能對被測物體中揮發(fā)性的N-亞進(jìn)行測量，測量的精度不高，而且測量過程中僅色譜測定這一環(huán)節(jié)就需要一個多小時的時間，而采用液相色譜儀全過程只需要13分鐘。

　　2、多環(huán)烴和雜環(huán)芳烴的測定

　　油炸、燒烤肉制品的制作過程中常常會產(chǎn)生多環(huán)烴和雜環(huán)芳烴等污染物，這種污染物中包含的3,4-苯并芘、二苯并芘是典型的致癌物，使用傳統(tǒng)的氧化鋁層析柱對其含量進(jìn)行測量起碼需要10個小時的時間，而使用液相色譜儀整個測量過程只需要數(shù)十分鐘。

　　3、芳香胺的測定

　　芳香胺是人工合成色素的主要原料，長時間大量攝入會導(dǎo)致對人體的代謝系統(tǒng)的強(qiáng)烈，容易誘發(fā)等疾病，由于芳香胺的添加本身是不合法的，所以對芳香胺的檢測工作比較重要。通常情況下液相色譜儀測定工作會在5分鐘內(nèi)完成，而傳統(tǒng)的TLC測定法則需要50分鐘的時間才能完成。