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液相色譜柱價格服務為先,聯(lián)方艾杰爾廣東代理

發(fā)布時間:2020-10-21 02:11  

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液相色譜柱的使用方法

關于色譜柱的安裝、維護、保存以及由色譜柱導致的這樣那樣的色譜故障也是一門學問。gao效液相色譜柱的正確使用包含:加裝保護柱,過濾流動相和樣品,凈化樣品,避免過高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時的沖洗等。

1.加裝保護柱

保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學污染,因此,加裝保護柱是必要的,特別是在分析中藥、zhong成藥等復雜混合物和生物樣品時更是保護分析柱必不可少的措施。

保護柱填料應與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析(50~100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時,應考慮更換保護柱。

2.過濾流動相和樣品

流動相通常由水或緩沖溶液與有ji溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過色譜柱的流動相均應過濾,但在實際操作上應視具體情況而有所區(qū)別:當有ji溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時,在能確保水和有ji溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時,過濾并無更多實際意義。3、離子交換色譜柱長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。

當流動相中含有緩沖鹽時,則過濾是必要的,如前所述,當緩沖溶液放置一段時間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應重新過濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0. 45μm ( 0. 22μm則更好)孔徑濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。

3.凈化樣品

當樣品中含有對色譜柱有損害的化學成分,如產(chǎn)生yong久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì),以及可能對柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團離子。在進樣前應盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過高柱壓

雖然gao效液相色譜柱能耐受的壓力可達6000 p si (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱z大允許壓力的一半為宜。

( 2)當流速較大時,應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動進樣閥時,進樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時,柱切換要避免在高壓下進行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱z高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動相pH接近使用限度時,更應降低使用溫度。

溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

正確及時的沖洗

開始試驗前,應了解柱中當前是何種溶劑。對于新色譜柱,如無特殊說明均為評價報告中所用流動相。柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。


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廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營:液相色譜柱,Kinetex色譜柱,Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱等等。所以說,方法是沒有錯的,色譜柱受污染時,我們應該先想到儀器也污染了。我們不斷追求,通過自身的不斷完善,可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標準物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材,是quan面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務實、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務,準確而快捷地滿足您的需要。

液相色譜柱問題總匯

液相色譜柱是液相色譜儀的核心,我們在使用過程中難免會遇見各種各樣的問題,今天就把液相色譜柱常見的一些問題和解決辦法分享給大家

1.液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?

①篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

②存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子

③可能柱超載,減少進樣量。

2.HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法是什么?

①樣品量不足,解決辦法為增加樣品量

②樣品未從柱子中流出??筛鶕?jù)樣品的化學性質(zhì)改變流動相或柱子

③樣品與檢測器不匹配。根據(jù)樣品化學性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器

④檢測器衰減太多。調(diào)整衰減即可。

⑤檢測器時間常數(shù)太大。解決辦法為降低時間參數(shù)

⑥檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。

⑦檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

⑧記錄儀測壓范圍不當。調(diào)整電壓范圍即可。

⑨流動相流量不合適。調(diào)整流速即可。

⑩檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。

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廣州聯(lián)方實驗器材有限公司成立于2005年,位于廣州番禺區(qū),是集技術和銷售于一體的企業(yè)。如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進樣多針。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學,歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結合的管理理念,自強不息、開拓進取、勤勉擔當,致力于把聯(lián)方打造成一個百年品牌、一個z專業(yè)的一站式實驗室采購平臺,追求質(zhì)量、追求服務、追求和創(chuàng)新??茖W化、精細化、專業(yè)化。服務理念:我們有著專業(yè)的銷售及售后服務團隊,可以為您提供實驗室建設的整套方案、有著的售前與盡心的售后服務和技術支持。我們不斷追求,通過自身的不斷完善,可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標準物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材,是的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務實、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。 我們有及時的送貨服務,準確而快捷地滿足您的需要。公司主營:Luna色譜柱,美國飛諾美色譜柱,Phenomenex色譜柱,手性色譜柱,Lux多糖類手性色譜柱等等

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色譜柱: Synergi 4 μm Fusion-RP

規(guī)格: 150 x 4.6mm

流動相: 20mM 磷酸鉀緩沖液,pH 值為 2.5

流速: 1.0mL/min

檢測: UV / 254 nm

進樣: 1 μL

溫度: 30 °C

樣品: 1. liu脲

2. 腺piao呤

3. G-5-MP

4. 胸腺mi啶

緩沖鹽使用不當對手性色譜柱有什么影響

在色譜分析過程中常常需要使用緩沖鹽來調(diào)節(jié)流動相的 pH 值,緩沖鹽的不當使用對色譜柱可能造成柱壓升高、柱效下降以及使化合物的保留時間發(fā)生變化等影響:

1)柱壓升高;

原因:緩沖鹽使用不當導致緩沖鹽析出,堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙,阻礙流動相傳質(zhì),引起柱壓升高。

2)相同化合物的保留時間發(fā)生變化;

原因:如果沒有沖洗干凈就進行進樣,色譜柱內(nèi)含有的鹽會使化合物的保留時間發(fā)生變化。

3)柱效下降;

原因:i)有些緩沖鹽會滲入到鍵合相的深處,損害硅膠基體,導致色譜柱鍵合相流失,柱床變松,柱效下降;ii)凝結在鍵合相表面,使C18 碳鏈難以舒展,對物質(zhì)的保留能力下降,導致柱效下降。

因此用過緩沖鹽后需要對色譜柱進行沖洗,水中緩沖鹽濃度較大時應特別引起注意。