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發(fā)布時間:2020-12-29 08:57  

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Tris常用作生物緩沖液,常配成pH值為6.8,7.4,8.0,8.8。其結構式,pH值隨溫度變化很大。一般來說,溫度每升高一度,PH值下降0.03。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如,在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以與醛發(fā)生縮合反應。Tris為弱堿,在室溫(25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.Chemicalbook5左右,一般加入鹽酸以調節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。






三羥(Tris)作為一種常用的生物緩沖劑,因它的結構簡單,反而有活性,易于參與反應,所以我們可以通過它的分子結構制備出與它相關的產品。如Bis-Tris, Tricine,TES,TAPS等均為生物化學實驗和分子生物學實驗中經常使用的緩沖劑,它們的分子結構中都含有Tris的分子結構。它也常被用作RNA雜交和DNA裂解的緩沖液。在Tris的使用中,需要注意:Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大,因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境。且來看看它在Bis-Tris, Tricine,TES,TAPS中如何發(fā)揮它的潛能的。






使用緩沖溶液的注意事項:不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-中的醋酸?,F(xiàn)在,不少實驗室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡便準確誤差恒定的特點,特別是在做成批樣品時更顯出它的優(yōu)越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-緩沖液中的醋酸也同理),從而,導致溶液失效,正確的做法是緩沖液應適量配制,使用后及時密閉并置于低溫中保存。





8mol/L乙酸鉀(potassium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L(KCl):溶解7.46g于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽?;蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。