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發(fā)布時(shí)間:2021-08-31 06:54  
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色譜條件:通常的色譜條件包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速和進(jìn)樣量。移動(dòng)相是指在制備流動(dòng)相所用水和試劑試液時(shí),水的電阻率一般不超過(guò)18.2兆歐,而水的電阻率不超過(guò)18.2兆歐,其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾,測(cè)試液采用色譜級(jí)別。用不同的方法對(duì)色譜柱會(huì)有不同的要求,但是每一種色譜柱都有其清潔要求,這在色譜柱中可以找到,必須按照以上的要求來(lái)進(jìn)行,否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱效下降,色譜柱的使用壽命縮短,檢測(cè)波長(zhǎng)會(huì)因品種的不同而有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測(cè)器燈能量的變化,如基線波動(dòng)大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,對(duì)檢測(cè)器電鏡能量的變化有可能是突然變小等。流動(dòng)速度也因品種而異,一般為1.0 ml/min,流速不能隨意改變,尤其作為 QC人員,但作為研發(fā)人員,有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證,會(huì)改變流速來(lái)評(píng)估該方法的適用性。對(duì)不同品種的進(jìn)樣量也有不同的規(guī)定,進(jìn)樣量這個(gè)現(xiàn)在都是自動(dòng)進(jìn)樣,所以進(jìn)樣精密度都是很好的,不用特別強(qiáng)調(diào)。
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,作為液相操作人員,必須認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想說(shuō)明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常維護(hù),掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的,所以只要嚴(yán)格按照操作要求操作,一般都不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題,當(dāng)然要特別指出的是對(duì)液相的日常維護(hù)保養(yǎng),如:液相的日常維護(hù)保養(yǎng),泵密封墊的清洗,系統(tǒng)管路的清洗,溶劑過(guò)濾頭的清洗等。第二,操作者在配制液相分析樣品時(shí),好由同一人單獨(dú)完成,以免不必要的意外誤差。
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下面的圖表是GS-MS在隔板扎針后的測(cè)試譜對(duì)比,樣品瓶中的溶劑是。黑線為溶劑空白譜圖,藍(lán)色曲線是蓋子正確上緊的譜圖,玫紅色曲線是壓蓋過(guò)緊的封蓋。很顯然,將蓋子擰得過(guò)緊的試樣會(huì)有較多的硅氧烷峰(注意:概率不是100%),硅氧烷峰更多說(shuō)明有隔墊碎屑掉入瓶中。用肉眼觀察的樣品瓶未見隔墊碎屑,說(shuō)明隔墊碎屑很小。當(dāng)蓋正確上緊時(shí),隔板呈現(xiàn)的狀態(tài)為平緩至略凹的狀態(tài)??梢酝ㄟ^(guò)觀察隔板的狀態(tài)判斷蓋子是否正確上緊,從而調(diào)節(jié)蓋子的松緊程度。對(duì)手勁比較大的小伙伴,可輕輕一擰,蓋就是太緊了,所以需要特別注意。
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若要正確壓蓋,則需調(diào)整壓蓋裝置。下面是調(diào)整蓋子的方法:先調(diào)整定位螺釘:先旋松鎖緊螺母,再根據(jù)所需松緊來(lái)確定螺釘?shù)母叨?如確實(shí)壓蓋松了,就把螺絲高度調(diào)低),將鎖緊螺母旋到底部鎖定位置。第二,在只依靠定位螺釘也無(wú)法調(diào)整壓蓋的情況下,使用內(nèi)六角扳手調(diào)整壓蓋中部的螺釘。若壓力過(guò)大,則內(nèi)六角扳手逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng),如壓得太緊則順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)。
HPLC (HPLC)作為一種、快速的分析分離技術(shù),在上個(gè)世紀(jì)70年代得到迅速發(fā)展,是現(xiàn)代分離檢測(cè)的重要手段。層析法的分離原理是:當(dāng)溶解于流動(dòng)相(mobile phase)的各組分通過(guò)固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和),其大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中的滯留時(shí)間也不同,從而先后從固定相中流出。也叫色層法,色譜法。
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HPLC法適用范圍很廣,樣品適用范圍廣,不受分析對(duì)象的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有化合物都包括高沸點(diǎn)、極性、離子型及大分子等,都可以用 HPLC分析測(cè)定,從而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足?,F(xiàn)有已知有機(jī)化合物中20%左右可用的氣相色譜分析方法,而80%需要 HPLC分析。液相色譜由于其分離、分析速度快、檢測(cè)靈敏度高、可分析分離高沸點(diǎn)、不氣化、熱不穩(wěn)定等生理活性物質(zhì)等特點(diǎn),已在藥典中得到了廣泛的應(yīng)用,并已在藥典中廣泛應(yīng)用。HPLC分析方法不受溫度和樣品沸點(diǎn)的限制,因而具有廣泛的應(yīng)用前景。HPLC技術(shù)經(jīng)過(guò)30多年的快速發(fā)展,在基礎(chǔ)理論、儀器設(shè)備、色譜柱等方面的研究日趨成熟,目前已成為化學(xué)化工、環(huán)境、藥學(xué)、食品等領(lǐng)域具優(yōu)勢(shì)的分離分析方法之一。