ELISA試劑盒的成分

1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標記: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記和顯色劑)

Elisa試劑盒的優(yōu)點

1．特異性強：不與其它細胞反應。

2．重復性好：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品，稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

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Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

顯色淡，靈敏度偏低

1  試劑盒未充分平衡 試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）

2  樣品不適合做ELISA檢測 樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件（例如稀釋液的成分）

3  酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥 防止板過于干燥

4  包被遭到破壞 操作溫和，移液槍不能碰到孔底

5  樣本和孵育條件不合適 按照說明書條件，建議孵育過程中全程振蕩孵育。

6  洗滌浸泡時間過長 按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間；

7  偶聯(lián)HRP試劑污染 棄去試劑，重新配置

8  錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑 棄去試劑，重新配置

9  TMB底物孵育時間過短，因非人為因素影響，需要優(yōu)化孵育時間 確定合適的孵育時間：人為判定-高濃度的標準品出現(xiàn)深藍色；S4-5有淡藍色；機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65

10  樣本濃度過高或存在基質效應 建議做不同稀釋倍數(shù)，確認樣本稀釋倍數(shù)。

11  濾光片設置有問題或者波長選擇不對 確認儀器設置及選擇正確的波長檢測。

12  酶標板不適合做ELISA 不能使用細胞培養(yǎng)板，建議使用ELISA高吸附力板子。