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發(fā)布時間:2021-07-25 15:28  

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重組酶聚合酶擴增技術是近年來建立起的一種新的核酸恒溫擴增技術,具有操作簡單、靈敏度高、特異性強、可在短時間內(nèi)快速擴增出目的片段等優(yōu)點,在動物疾病早期診斷、現(xiàn)地檢測、進出口快速檢疫等方面具有良好的應用前景。




重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動 DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的 DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。



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一種基于CRISPRCas的常溫等溫快速檢測核糖核酸的技術及檢測方法.本發(fā)明旨在生物體外利用公開的多種基因工程酶與化學組分進行核糖核酸擴增,并通過一種或多種核酸酶,在常溫等溫條件下實現(xiàn)快速,一步或兩步的完成特定核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)的擴增與檢測過程,使對各種核酸的檢測更快速和更簡便.包括以下步驟:(1)通過核酸提取得到待檢測樣本的RNA或單鏈DNA或雙鏈DNA;(2)利用逆轉錄酶,轉錄酶,核糖核酸酶H,CRISPR相關蛋白13的組合酶以及核酸熒光探針與待檢核酸在等溫進行反應,若待檢測核酸為DNA,在反應前增加預變性的步驟;(3)通過檢測熒光信號,判斷待檢測樣本中是否存在目標核酸。