等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產(chǎn)物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產(chǎn)物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應。

試劑盒

自PCR技術誕生以來已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實時定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR，這一技術在不斷蛻

變卻從未淡出我們的視野。近年來，等溫擴增技術的興起無疑是對PCR的巨大挑戰(zhàn)。

等溫擴增技術的基因快速診斷方法,涉及生物檢測技術領域,具體是用體外生物檢測試劑快速檢測病原微

生物的一種技術。

包括如下步驟:一、對被檢樣品進行預處理;二、包括目標靶基因數(shù)據(jù)庫的建立;生物信息學的分析比較;

基因組多態(tài)性的分型處理和簡并堿基的運用,獲得各種靶基因的特異性引物兩對,分別與靶基因中的六個

獨立區(qū)域序列特異性匹配;三、進行等溫擴增反應;四、分析判斷結果。該方法的優(yōu)點:不需特殊試劑與

設備;高特異性;.靈敏度高;鑒定簡便;用途廣: 可用于食品、藥品、化妝品等領域的質(zhì)量控制和環(huán)境、

水質(zhì)等監(jiān)測;用于醫(yī)學臨床診斷,用于代謝性疾病和遺傳疾病的基因診斷。

核酸試劑盒

RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。RPA擴增的基礎體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑，我們只要準備好引物和模板就行。擴增結果可以通過凝膠電泳進行終點檢測，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個基礎體系中添入不同的酶和探針，就可以實現(xiàn)多樣化的RPA應用。舉例來說，TwistAmp? exo結合了exo探針技術和核酸外切酶III，能實現(xiàn)數(shù)據(jù)的實時讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少，適合獲得強熒光信號進行動力學分析，不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術、核酸外切酶III和逆轉錄酶結合起來，可以一步實現(xiàn)RNA模板的實時擴增。

距離新冠疫情發(fā)生已經(jīng)近4個月了，不少科研工作者都積極投身到了新冠的相關研究當中……

試紙條是一款基于側向層析技術和膠體金標記技術的即用型快速檢測試紙條。該款試紙條可用于蛋白、基因擴增產(chǎn)物（PCR，LAMP，RPA）的定性/半定量檢測。研究者需要自行設計分別標記有生物素的特異性檢測物（如抗原、探針）和標記有FITC的特異性檢測物（如探針）。