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發(fā)布時間:2021-04-25 08:21  

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廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。(3)目前real-timeQ-PCR實驗成本比較高,從而也限制了其廣泛的應用。

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一、充分認識養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲排查的重要意義。強化養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲排查,是當前疫情防控的關鍵措施,是及時發(fā)現(xiàn)和消除風險的重要手段,有利于非洲i疫情“早發(fā)現(xiàn)、早報告、早處置”,有利于降低運輸、屠宰、生產(chǎn)加工等下游環(huán)節(jié)疫情傳播風險。二、鼓勵規(guī)模豬場和種豬場開展非洲自檢。鼓勵規(guī)模豬場、種豬場配置檢測儀器設備,規(guī)范使用經(jīng)我部批準或經(jīng)中國動物疫病預防控制中心比對符合要求的檢測方法,自行開展非洲檢測。分子遺傳學診斷技術多以遺傳物質(zhì)DNA為檢測對象,不需要進行細胞培養(yǎng),為傳統(tǒng)的細胞染色體核型分析技術提供了有效的補充。

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臨床上非洲真正感i染方式往往是通過豬與豬、豬與環(huán)境等直接接觸感i染非洲,即自然感i染。自然感i染實驗結果顯示,非洲自然感i染情況下,唾液可以早于血液3~20天檢測出非瘟病毒,便于早期篩查!目前在real-timeQ-PCR中最廣泛使用的TaqMan系統(tǒng)就是運用了這個原理。。豬群一旦出現(xiàn)不吃料、減料、輕微發(fā)熱等疑似發(fā)病癥狀,可立即采集豬的唾液、肛腸拭子等混檢,有助于疫情的提早發(fā)現(xiàn)。如果在血液中檢測到了非洲病毒,說明豬場很有可能已經(jīng)較大面積感i染非洲病毒。


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生豬屠宰企業(yè)作為產(chǎn)業(yè)鏈條上的重要主體,防控動物疫病、保證產(chǎn)品質(zhì)量安全是應盡的責任。屠宰廠(場)生產(chǎn)設施設備和環(huán)境一旦被污染,病毒更易長期存活,更易在生豬和豬肉產(chǎn)品中循環(huán)擴增,成為病毒的“儲存器”“擴增器”。生豬屠宰廠(場)連接著生豬產(chǎn)銷等上下游環(huán)節(jié),便于“順藤摸瓜”及時發(fā)現(xiàn)和追溯潛在風險。相比其他環(huán)節(jié),在生豬屠宰廠(場)開展檢測更容易采集樣品,實現(xiàn)i大限度的檢測覆蓋面,結合臨床和剖檢情況綜合判斷。從目前情況看,大部分屠宰廠(場)能夠開展非洲病毒自檢。廣州勱博--食品加工企業(yè)/公司/廠PCR如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號,它可用于定義樣本的域值循環(huán)數(shù)(Ct)。

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對檢測的要求是:生豬屠宰廠(場)應當在駐場官i方獸醫(yī)監(jiān)督下,按照生豬不同來源實施分批屠宰,每批生豬屠宰后,對暫儲血液進行取樣并檢測非洲病毒;或者根據(jù)實際情況,在生豬進場前以生豬運輸車輛為單位采集全部生豬血液樣品,混合后進行檢測。屠宰過程中發(fā)現(xiàn)疑似非洲典型病變的,要立即停止屠宰,將可i疑生豬轉(zhuǎn)至隔離間,并采集病變組織和血液樣品進行檢測。對檢測結果應用的要求是:屠宰廠(場)檢測非洲病毒為陰性且按照檢疫規(guī)程檢疫合格的,駐場官i方獸醫(yī)方可出具動物檢疫證明,并注明檢測方法、日期和結果等信息。當互補序列出現(xiàn)時,探針與DNA雜交,探針轉(zhuǎn)變成一個開放的結構,呈線性,報告熒光基團與淬滅熒光基團彼此在空間上產(chǎn)生足夠的分離,熒光基團脫離了淬滅基團的影響,從而產(chǎn)生可被檢測到的熒光。


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FQ-PCR在醫(yī)學栓測中有價值的應用領城就是對感i染性疾病的診斷,只要有限的核酸序列清楚,運用FQ-PCR技術,檢測任何病原體。目前,對一些培養(yǎng)周期長或缺乏穩(wěn)定可靠的檢測手段的病原體,可以考慮用FQ-PCR檢測,為臨床診斷提供依據(jù)FQ-PCR對病原體的檢測克服了免i疫學檢測的“窗口期“問題,可判斷疾病是否隱性或亞臨床狀態(tài)。FQ-PCR技術可以應用于腫癟的研究及診斷。廣州勱博--冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化QF-PCR技術在國外已有較廣泛的應用,但目前尚未在國內(nèi)產(chǎn)前診斷臨床中普遍開展。

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實時熒光定量PCR的基本原理:理論上,PCR過程是按照2n(n代表PCR循環(huán)的次數(shù))指數(shù)的方式進行模板的擴增。但在實際的PCR反應過程中,隨著反應的進行由于體系中各成分的消耗(主要是由于聚合酶活力的衰減)使得靶序列并非按指數(shù)方式擴增,而是按線性的方式增長進入平臺期。因此在起始模板量與終點的熒光信號強度間沒有可靠的相關性。如采用常規(guī)的終點檢測法(利用EB染色來判斷擴增產(chǎn)物的多少,從而間接的判斷起始拷貝量),即使起始模板量相同經(jīng)PCR擴增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點熒光信號強度。熒光定量PCR結果可以用于定性(判斷一段序列的有無),也可以用于定量(確定DNA拷貝數(shù)),即qPCR,而常規(guī)PCR只能做半定量。



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傳統(tǒng)的PCR定量是應用終點PCR來對樣品中的模板量進行定量,通常用凝膠電泳分離,并用熒光染色來檢測PCR反應的終擴增產(chǎn)物。但在PCR反應中,由于模板、試劑、焦磷酸鹽分子的聚集等因素影響聚合酶反應,終導致PCR反應不再以指數(shù)形式進行而進入“平臺期”,而且一些反應的終產(chǎn)物比另一些要多,因此終點PCR反應方法定量并不準確。此外,終點PCR還容易交叉污染,產(chǎn)生假陽性。還有,由于PCR反應和檢測都在反應管中進行,樣品污染的幾率大大降低,無需擴增后的實驗操作。

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核酸提取儀原理是,經(jīng)裂解液裂解后,細胞核中會釋放出核酸分子,會被吸附在磁珠表面,而蛋白質(zhì)等物質(zhì)不會被吸附,結合了核酸的磁珠被磁性物質(zhì)固定在管壁上轉(zhuǎn)移到洗脫管中,經(jīng)過反復洗脫,后我們可以得到純凈的DNA。根據(jù)其使用范圍可以分為兩類,一種是大型核酸提取儀,另一種是小型核酸提取儀;廣州勱博--養(yǎng)殖場PCRPCR檢測同熒光PCR類似,都是使用的引物和探針以VP72編碼區(qū)域作為靶基因設計,該基因研究清楚,且高度保守,即使在滅活或降解的樣品中也可檢測到已知所有22種p72病毒基因型的多個毒株。主要是利用磁珠純化核酸及蛋白質(zhì)從而達到提取核酸的目的,在細胞、動植物組織等研究方面,一個樣品用一個探針,有效防止樣品之間的交叉污染。