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發(fā)布時間:2021-01-01 16:07  

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三羥英文簡稱為Tris,英文名為2-Hydroxymethyl-2-nitro-1,3-propanediol,是一種重要的生物化學(xué)、化學(xué)和。Tris是常見的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液成分和滴定標準物,作為可有效地急性肺損傷患者酸,誘導(dǎo)磷脂雙層膜形成波紋結(jié)構(gòu)的單層膜。同時還被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,以及其他多種重要用途。




使用緩沖溶液的注意事項:不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-中的醋酸?,F(xiàn)在,不少實驗室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡便準確誤差恒定的特點,特別是在做成批樣品時更顯出它的優(yōu)越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應(yīng)注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-緩沖液中的醋酸也同理),從而,導(dǎo)致溶液失效,正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制,使用后及時密閉并置于低溫中保存。




許多緩沖液中含有NaCl,以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理條件。一般常用150 mM的NaCl。

    在不同的蛋白純化步驟中,可能需要改變鹽離子的濃度。例如,如果是通過離子交換層析進行蛋白純化,一開始需要降低鹽離子的濃度(5~25mM)避免高離子強度和蛋白競爭和填料結(jié)合,這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿,從而使柱子能夠結(jié)合目的蛋白,洗脫除去雜蛋白。





8mol/L乙酸鉀(potassium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L(KCl):溶解7.46g于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽。或稱取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。