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隨著流動相的腳印，泵到了高壓泵，是液相色譜中核心的部分，也是昂貴的一個組成部分，要小心使用：3.1許多情況下，泵的問題都反映在壓力上，壓力波動也是常見的一類問題，泵的正常壓力波動一般在2%以內(nèi)，切變平穩(wěn)，異常波動通常是由于氣泡和鹽引起的：如果流動相中的氣泡沒有被脫氣機除掉，那么就會產(chǎn)生壓力波動，通常我們可以通過重新 purge流和再脫氣流來解決這類問題；鹽造成的波動主要是因為在流動相中加入了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動相與有機相混合時，鹽會有微小的析出，從而導(dǎo)致壓力異常波動，解決這類問題可以考慮適當(dāng)?shù)慕档望}濃度，或者使用代替有機相，如果由于各種原因要用到這種流動相，那么就會產(chǎn)生壓力波動，因此，解決這類問題可以考慮適當(dāng)降低鹽濃度，或者用代替有機相，如果由于各種原因要用到這種流動相，那么就會產(chǎn)生壓力波動，因此，解決這類問題可以考慮適當(dāng)?shù)慕档望}濃度，或者用代替有機相，如果由于各種原因要用到這種流動，那么就會造成壓力波動，所以在含鹽流動相與有機相混合時，鹽會有微小的析出，從而導(dǎo)致壓力異常波動，解決這類問題可以考慮適當(dāng)降低鹽濃度，

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在水泵維修中還有一項經(jīng)常要做的工作是更換 purge閥上的濾白頭，其實難點不是更換這個白頭本身，而是要判斷什么時候換水，通常判斷標(biāo)準(zhǔn)是是否要更換這個白頭，而要考慮更換的標(biāo)準(zhǔn)。替換下來的白頭，還可以斷定儀表的使用情況：如果白頭是白的，看起來不臟，但就是堵，有可能是流動相中的鹽分有析出，這臺儀器長期忍受高鹽流動相。

柱溫箱，在柱溫箱中有色譜柱，實際上分離是發(fā)生在色譜柱上，柱溫箱本身的保養(yǎng)和使用要點并不多說。小探認(rèn)為，實際上柱溫箱是整個液相色譜系統(tǒng)中皮實的一個部件，只要保證接頭擰緊不漏氣，好像一萬年都看不出來它出了什么問題，要注意的是安捷倫的柱溫箱會有兩個控制溫區(qū)，左邊寫著3 uL，右邊寫著6 uL，一般情況下，我們要用3 uL的柱溫箱，一般情況下，我們要使用3 uL的那個，以減小儀器的延遲和擴散。

探測器。探測器的種類很多，而且各有千秋，在此我們還是要找大家的紫外光(VWD)/二極管陣列(DAD)探測器。兩者均為紫外類檢測器，盡管光路設(shè)計不同，但基本原理是一致的。6.1探測系統(tǒng)中一個非常重要的部分是光源，俗稱燈，它是一種消耗品，就像家里的燈泡，用到一定程度就壞了。但家中的燈泡不能像家里的燈泡那樣點不亮?xí)r要更換，因為放在檢測器中的燈是需要發(fā)射能量的，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)基線噪聲變大、靈敏度降低等一系列問題。一般情況下，燈泡的壽命是2000 h，當(dāng)達到這一時，我們就特別注意燈泡的能量狀況，可以在儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”來判斷，測試結(jié)果將分別對低、高三個波長段的能量進行評估，一旦某一波長段的結(jié)果顯示失敗，就表示要換燈，通常個失敗的是低波長段。檢測器中的另一個重要部分是檢測器，也被稱為流通池。許多時候，大家關(guān)心的是檢測池是否被堵住，因為檢測池一般不耐壓，所以一旦堵住，很容易造成損壞。

泵用后不能及時清洗移動相中不得含有腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動相不能留在泵中，特別是當(dāng)泵停泵過夜或更久時。若含有緩沖液的流動相留在泵中，可能會析出鹽的微晶，如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞，甚至只是因為溶液處于靜止?fàn)顟B(tài)時，會析出。所以，必須用純水將泵完全清洗干凈，然后轉(zhuǎn)換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相，可能是或-水)流相去空水泵工作時要注意防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完，否則泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、氣缸或密封環(huán)，終造成泄漏。如果沒有流動相的外流，沒有壓力指示怎么辦？也許是泵內(nèi)有大量的氣體，此時可開啟泄壓閥，使泵在較大流量(如5 ml/min)下運轉(zhuǎn)，排出氣泡，也可用一個50 ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。

不穩(wěn)定的壓力和流量其原因可能是需要排除的氣泡；或單向閥內(nèi)有異物，可卸下單向閥，浸入內(nèi)超聲清洗。有時候可以是砂濾棒內(nèi)部出現(xiàn)氣泡，或者被細(xì)小鹽粒或滋生微生物部分堵塞，此時，可卸下砂濾棒浸入流動相超聲除氣泡，或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物，或?qū)Ⅺ}溶解，再立即清洗。為什么壓力太大還是太低？也許是管道堵塞了，需要清理清理。另一種可能是由于管道出現(xiàn)了泄漏。檢驗阻塞或泄漏時，應(yīng)逐段進行。采用梯度洗脫時，由于多種溶劑混和，組分不斷變化，產(chǎn)生了一些特殊問題，必須引起足夠的重視。PS:(在液相色譜中對成分復(fù)雜的樣品，采用梯度洗脫法。在同一分析周期內(nèi)，不停地改變流動相的濃度比例，稱為梯度洗脫。這樣，在一個復(fù)雜樣品中，性質(zhì)差異較大的組分，就能達到各自合適的容量因子 k的分離效果。

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保持石英反應(yīng)管清潔可延長壽命

在使用石英反應(yīng)管時，如樣品分解不完全、催化劑失效、分析污染(如樣品含有硅、磷、鐵)等，都會引起腐蝕和污染，應(yīng)及時處理。按照污染物的不同可選用、酸、去離子水進行清洗，必要時采用高溫灼燒。

高溫下快速冷卻石英反應(yīng)管影響壽命

石英管雖然在高溫下可以長時間使用，但由于石英管的膨脹系數(shù)不同于管內(nèi)加料，所以它的加溫和冷卻速度是一定的。儀表打開后，升溫、冷卻的速度由程序控制，但關(guān)機為人工操作，一般應(yīng)將氣關(guān)關(guān)閉，溫度下即斷氣斷電，使用溫度下即斷氣斷電將石英管斷電。

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色譜柱的清洗(一般方法)?洗脫液中沒有緩沖液或鹽類物質(zhì)，提高組成洗脫液的的濃度，清洗柱中殘留較大的物質(zhì)，可用100%的清洗。尤其是脂溶性較高的組分被吸附在柱子中，如果加入 THF，有時可以達到比較好的效果。·如果洗脫液含有緩沖液或鹽類物質(zhì)，首先要按照以前相同的方法將不含這類物質(zhì)的水/混合液(與洗脫液相等)置換。若緩沖液或鹽分級為50 mM，則應(yīng)采用60%水溶液直接置換。CN柱采用非水性流動相進行正分離，當(dāng)推測其極性成分出現(xiàn)柱內(nèi)吸附時，應(yīng)采用異等方法清洗。·在 pH值臨界點附近使用后，如果只用水清洗，則可能導(dǎo)致色譜柱的劣化。需要替換成上述所述的水/混合物或60%水溶液。?如蛋白質(zhì)或多糖等高分子化合物附著在柱子上，通常難以用清洗方法除去附著物。如果用這種物質(zhì)或雜質(zhì)較多的樣品進行分離，樣品應(yīng)先進行預(yù)處理。