病毒分離純化挑戰(zhàn)與突破

 春節(jié)期間一場(chǎng)突如其來的新型冠狀病毒肺l炎疫情導(dǎo)致超近8萬人感l染，超過2700人失去生命，1000多萬人口的武漢實(shí)施了史l上前l所未有的封城。這個(gè)讓中國(guó)的經(jīng)濟(jì)活動(dòng)幾乎處于停頓狀態(tài)，讓全世界感到恐慌的肺l炎疫情卻是由小小的病毒引起的，它們是如此之小，以至于您無法在光學(xué)顯微鏡看清楚它們。這次疫情即讓我們體會(huì)到自然界的威力也讓我們體會(huì)到自然界無窮的奧妙。即使是科學(xué)技術(shù)高度發(fā)達(dá)的今天對(duì)這種病毒的了解也是非常有限，對(duì)病毒引起的很多疾病我們也沒有很多好的應(yīng)對(duì)方法。人類不僅僅只是這次遭受病毒引起的肺l炎疫情磨難，其

實(shí)各種流l感、艾l滋病、麻l疹、風(fēng)l疹、天花、水l痘、病l毒性肝l炎、流行性乙型腦炎等各種疾病都是病毒引起的。

抗l體藥l物市場(chǎng)及發(fā)展趨勢(shì)  

 全球生物制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，根據(jù)Frost&Sullivan市場(chǎng)調(diào)研，2018年全球生物制藥市場(chǎng)規(guī)模約為2642億美元。單抗類藥l物由于特異性好，靶向性高，副作用小，療l效顯著成為發(fā)展快的一類生物藥。單抗藥l物在全球生物藥中所占市場(chǎng)份額超過50%，達(dá)到1353億美金。

   中國(guó)巨大的市場(chǎng)潛力，國(guó)際重磅抗l體藥到期，大量的海歸人才回流及中國(guó)日益強(qiáng)大的資本助力，都為中國(guó)抗l體制藥發(fā)展提供了前l所未有的歷史機(jī)遇。但是中國(guó)抗l體制藥企業(yè)也面臨巨大的挑戰(zhàn)。首先中國(guó)藥企無論是技術(shù)、規(guī)模、經(jīng)驗(yàn)，人才還是資金，跟國(guó)際生物制藥巨頭相比，都有著較大的差距。其次中國(guó)加入ICH和國(guó)際藥監(jiān)管體系接軌，降低藥品進(jìn)口關(guān)稅，對(duì)進(jìn)口抗l癌藥l物實(shí)施零關(guān)稅等系列政策，降低了國(guó)外原研藥進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)的門檻，給中國(guó)生物藥企業(yè)帶來了巨大壓力和挑戰(zhàn)。另外，越來越多的制藥企業(yè)進(jìn)入抗l體藥的開發(fā)領(lǐng)域，每個(gè)重磅抗l體藥l物基本上都有幾十家企業(yè)在仿l制研發(fā)申報(bào)，因此國(guó)內(nèi)抗l體藥企不僅要面臨國(guó)外原研藥巨頭的打壓，還要面對(duì)國(guó)內(nèi)眾多同行及印度廉價(jià)藥企業(yè)激烈的競(jìng)爭(zhēng)。后帶量采購(gòu)新政允許通過一致性評(píng)價(jià)的仿l制藥與原研藥可以一起同臺(tái)競(jìng)標(biāo)，低價(jià)中標(biāo)，消除了銷售渠道的壁壘使得國(guó)內(nèi)外生物藥企的競(jìng)爭(zhēng)回歸到技術(shù)，產(chǎn)品質(zhì)量和成本的競(jìng)爭(zhēng)。 因此國(guó)內(nèi)生物藥企是否能在激烈的競(jìng)爭(zhēng)中取得優(yōu)勢(shì)取決于其生產(chǎn)工藝的先進(jìn)性，因?yàn)橹扑幑に囁經(jīng)Q定了產(chǎn)品的質(zhì)量和成本。

分離純化抗l體的目的。野l生型Protein A蛋白是金黃色葡l萄球菌細(xì)胞壁錨釘?shù)鞍住ＨS空間上，抗l體FC端CH2-CH3區(qū)域與Protein A蛋白B結(jié)構(gòu)域上兩條反相平行的α螺旋結(jié)構(gòu)相互結(jié)合。因此Protein A與抗l體分子特別是與IgG1、IgG2、IgG4有特異性結(jié)合，使得抗l體分子與發(fā)酵液中不具FC端結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)如宿主蛋白與核酸等有效分離，進(jìn)而達(dá)到純化目的。Protein A 親和層析介質(zhì)是通過把ProteinA 配基偶聯(lián)到微球介質(zhì)上制備而成的。因?yàn)镻rotein A配基與目標(biāo)抗l體的作用的專一性，因此親和層析的分離純化工藝和方法與抗l體樣品雜質(zhì)含量和種類多少影響不大，使用Protein A 介質(zhì)一步純化目標(biāo)抗l體就可以達(dá)到95%以上純度，回收率達(dá)到90%以上。親和純化效率也基本不受雜質(zhì)多少影響，而其它分離模式如離子交換，疏水，分子篩等的分離工藝方法及效率大多取決于與目的蛋白同時(shí)存在的雜質(zhì)種類和含量。因此，只要樣品雜質(zhì)不同，即使是純化同樣的目標(biāo)生物分子，采用的分離工藝和方法就不同。以重組胰島素分離純化為例，不同廠家雖然生產(chǎn)的是同一目標(biāo)胰島素，但采用分離純化方法完全不一樣，主要原因就是每家生產(chǎn)的胰島素雜質(zhì)組成和含量不一樣，因此需要不同的純化工藝。而比胰島素分子量更大，結(jié)構(gòu)更復(fù)雜的抗l體基本可以采用標(biāo)準(zhǔn)化的三步曲，主要原因就是Protein A 親和介質(zhì)的出現(xiàn)大大簡(jiǎn)化抗l體的分離純化工藝，但Protein A 價(jià)格昂貴讓抗l體生產(chǎn)廠家愛恨交加。