樣品如果溶解度太低如何上制備HPLC？

（1）了解一下樣品的性質(zhì),根據(jù)其酸堿性,極性等性質(zhì)，通過調(diào)節(jié)溶劑的pH值等,以達(dá)到較好的溶解度。

（2）樣品可能某種晶型難溶，這樣可以加入其他溶劑以助溶。

（3）不是一定要用流動(dòng)相來溶解樣品，對(duì)溶解度差的樣品，可以選擇甲醇，THF或DMSO等溶解樣品。特別是DMSO，對(duì)一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留，不會(huì)造成干擾。而且DMSO的洗脫能力很弱，一般不會(huì)影響峰型。

（4）可以固體上樣。

備型柱子柱壓上升，柱效下降，怎么辦？

對(duì)高的價(jià)值的制備柱來講，延長柱子壽命是很重要的。一般要注意保護(hù)柱子，一般來說，制備柱子一般需要保護(hù)柱配套。

下面是可能堵塞柱子的原因：

（1）如果您所分離的樣品中雜質(zhì)較多而您在上樣前沒有經(jīng)過過濾（0.45微米），一些顆粒性雜質(zhì)會(huì)積聚在柱頭造成柱壓升高。

（2）也有可能是因?yàn)槟褂玫牧鲃?dòng)向中含有緩沖鹽的原因，結(jié)晶或發(fā)生化學(xué)變化而堵塞?？梢园阎記_一沖。

（3）流動(dòng)相是否符合液相色譜的要求？是否過濾處理？

同一種填料的分析柱、制備柱按線形放大公式套，分離度會(huì)不會(huì)變化？

一般會(huì)有一定的變化，原因有以下幾點(diǎn)：

（1）制備柱的裝填是否均勻，如不均勻則可能產(chǎn)生渦流擴(kuò)散使各個(gè)組分的經(jīng)過通道的直徑不同、阻力不一樣，停留時(shí)間不同，色譜峰可能變寬。

（2）如果樣品在流動(dòng)相中溶解度小，在制備色譜上會(huì)有不同的峰展寬。

（3）如果樣品在分析柱上有展寬或拖尾的現(xiàn)象，放大到制備柱上后峰的展寬和拖尾經(jīng)常會(huì)非常嚴(yán)重，導(dǎo)致分離失敗。

反相色譜分離后，如何快速從流動(dòng)相中得到產(chǎn)品？

可以考慮先在低溫下，減壓旋蒸除去其中的有機(jī)的溶劑，然后用萃取的方法把產(chǎn)品萃取出來，然后再低溫再旋蒸，這樣，就可以不將溫度升得很高而得到產(chǎn)品。如果要直接蒸掉流動(dòng)相，水泵的真空度要注意（要檢查氣密性），否則蒸水會(huì)很慢。一般比較好的泵在60～70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80～90度才行，這樣容易暴沸導(dǎo)致樣品損失。溫度太高可能引起物質(zhì)變性。