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發(fā)布時間:2021-09-06 13:48  
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全自動核酸提取儀介紹
全自動核酸提取儀,是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型自動核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。大型自動液體工作站因為設(shè)備成本高昂,運行成本高,適合一次提取幾千個同一種類標(biāo)本,所以真正得到應(yīng)用的比較少;而小型自動化的儀器,因為儀器設(shè)備和運行成本低,操作方便 得到越來越多的應(yīng)用。
全自動核酸提取儀簡介
核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。它可替代原來復(fù)雜的手動操作,儀器自動完成對細(xì)胞或組織的處理,分析提取出目標(biāo)DNA/RNA。
目前市場上的核酸提取儀的提取原理主要分為兩種:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市場主流地位。
磁珠法提取核酸是通過細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,從細(xì)胞中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中。反應(yīng)一定時間之后,再在磁場作用下,使磁性顆粒與液體分開,回收顆粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。
全自動核酸提取儀分類
根據(jù)儀器型號大小不同劃分
1) 自動液體工作站
自動液體工作站是功能非常強(qiáng)大的設(shè)備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴(kuò)增、檢測等功能,實現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應(yīng)用,不太適合常規(guī)實驗室提取核酸,一般都應(yīng)用在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。
2) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器是通過運行結(jié)構(gòu)的特殊性來達(dá)到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應(yīng)用。
全自動核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能完全的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨立溫控,這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機(jī)要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。