蛋白質(zhì)結(jié)晶方法

液-液擴(kuò)散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中，蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個(gè)有小孔的毛細(xì)管中，一個(gè)測(cè)熔點(diǎn)用的毛細(xì)管一般即可（如圖1.2）。下層是密度大的溶液，例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑，它會(huì)在上層。以1：1混合，沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液（各自約5μl）通過(guò)針頭導(dǎo)入毛細(xì)管，先導(dǎo)入下層的。通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)易的搖擺式離心機(jī)去除氣泡。再加入上層，進(jìn)而兩層之間形成一個(gè)明顯的界面，它們會(huì)逐漸彼此擴(kuò)散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno（1994）已經(jīng)發(fā)展液-液擴(kuò)散技術(shù)至法。蛋白質(zhì)溶液通過(guò)毛細(xì)力被吸入狹窄的管中，管的一端是封閉的。接著，開放端入置于小容器的凝膠中，凝膠使得管豎直，蛋白質(zhì)溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上，整個(gè)裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過(guò)凝膠和毛細(xì)管的擴(kuò)散時(shí)間可以由毛細(xì)管插入凝膠的深度控制，從而蛋白質(zhì)溶液中即可形成過(guò)飽和區(qū)域，毛細(xì)管底部高而頂部低。這也可作為一個(gè)篩選佳結(jié)晶條件的額外信息。

蛋白質(zhì)晶體板結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)晶體板晶體中的肌紅蛋白結(jié)構(gòu)會(huì)不會(huì)與溶液或中的很不一樣？將溶液、和晶體中肌紅蛋白的活性、吸收光譜、α-螺旋含量加以對(duì)比，即可打消這個(gè)顧慮。另外，海豹的肌紅蛋白和鯨的肌紅蛋白晶型很不一樣，但結(jié)構(gòu)都很一致，從而說(shuō)明這個(gè)具有活性的三級(jí)結(jié)構(gòu)的性。血紅蛋白由四條多肽鏈組成，記號(hào)為α2β2。它們各與血紅素結(jié)合，形成四個(gè)亞基。四個(gè)亞基聚集在一起的方式稱為四級(jí)結(jié)構(gòu)。亞基之間殘基的順序都有些差別，但結(jié)構(gòu)很相似。

蛋白結(jié)晶板使用

在基因組、蛋白質(zhì)組、納米技術(shù)中，結(jié)晶學(xué)是一門關(guān)鍵的科學(xué)。在這些研究領(lǐng)域中，通過(guò)X射線進(jìn)行單晶結(jié)構(gòu)分析來(lái)探測(cè)分子的三維結(jié)構(gòu)是很重要的技術(shù)。其中大分子晶體研究是主要的挑戰(zhàn)，GREINER生產(chǎn)一系列的產(chǎn)品來(lái)滿足這一應(yīng)用。

有一平臺(tái)，平臺(tái)中有一個(gè)方形平底的結(jié)晶池，用于接收樣品，

每池容量3.9μl池底透明。

標(biāo)準(zhǔn)形板，方形池：96孔，方形孔，孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計(jì)

有一平臺(tái),平臺(tái)中有三個(gè)方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池

容量4.1μl,池底透明.

標(biāo)準(zhǔn)形板,圓形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計(jì)有一

平臺(tái),平臺(tái)中有三個(gè)圓形U底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池容量

蛋白結(jié)晶板

近年來(lái),晶狀體蛋白質(zhì)組學(xué)的相關(guān)研究日漸廣泛.蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)以其高通量,等優(yōu)勢(shì),為晶狀體這一人體內(nèi)蛋白質(zhì)含量高組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)支撐,從而為揭示年齡相關(guān)性白的發(fā)生機(jī)制提供了新思路和新方向.本文就蛋白質(zhì)組學(xué)的分離,鑒定及相關(guān)新技術(shù)在晶狀體蛋白研究中的應(yīng)用進(jìn)展做一系統(tǒng)綜述。

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