廣州碩譜生物科技有限公司辛基SPE柱分類

為什么反相填料C18使用時(shí)建議溶液的PH范圍是2-8？

C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠，pH值超出酸性范圍時(shí)，鍵合相十八烷1基易發(fā)生水解而流失；當(dāng)流動(dòng)相pH超出堿性范圍時(shí)，會(huì)加速硅膠的溶解。這兩種反應(yīng)均是不可逆的反應(yīng)，會(huì)影響填料的性能。

當(dāng)我們極端pH條件下需要使用反相填料時(shí)，建議使用聚合物基質(zhì)的反相填料，如HLB,PSD等，聚合物基質(zhì)的填料pH耐受范圍是1-14，適用范圍非常廣哦。

SPE小柱的使用過(guò)程

下面我們?cè)O(shè)定填料為保留目標(biāo)化合物，分析過(guò)程如下：

1、預(yù)洗活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)，飽和平衡柱。依次用強(qiáng)溶劑、弱溶劑（緩沖溶液）進(jìn)行活化。

2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分通過(guò)吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

3、淋洗——用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨Ａ舻母蓴_物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

4、洗脫——用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)從吸附劑上洗脫下來(lái)并收集。

固相萃取小柱的選擇固相萃取柱的種類很多，具體實(shí)驗(yàn)工作中，需根據(jù)分析對(duì)象、檢測(cè)手段及實(shí)驗(yàn)室條件合理選擇合適填料、合理規(guī)格的固相萃取柱。要考慮固相萃取柱對(duì)分析對(duì)象的萃取能力、樣品溶液的體積、洗脫后溶液的zui終體積、及樣品溶液中被測(cè)物及干擾物的總量。B：甲1醇流速：1mL/min進(jìn)樣量：5μL柱溫：35℃檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm。

一般被柱中吸附劑吸附的被測(cè)物及干擾物的總質(zhì)量不應(yīng)超過(guò)吸附物總質(zhì)量的5%。洗脫劑的體積一般應(yīng)是萃取柱柱床體積的2-5倍。?

回收率低在一次完整的SPE操作中，目標(biāo)化合物可能會(huì)存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物沒(méi)有回收或回收率低” 現(xiàn)象發(fā)生時(shí)，可向樣品溶液加入標(biāo)液，然后進(jìn)行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析。

首先確定目標(biāo)化合物存在于哪一部分，進(jìn)而確定問(wèn)題來(lái)自下列哪一環(huán)節(jié)：目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足；目標(biāo)化合物未被完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

色譜柱的技術(shù)都有哪些？比如封尾等，這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？

答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門(mén)藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。SPE也是一個(gè)柱色譜分離過(guò)程，分離機(jī)理、固定相和溶劑的選擇等方面與高1效液相色譜（HPLC）有許多相似之處。

固相萃?。⊿PE）技術(shù)做為樣品處理的一種重要的方法廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、制藥、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。

實(shí)驗(yàn)室中常用的固相萃取常用方法：

? 重力

? 價(jià)格便宜，速度慢，完全靠重力沒(méi)法保證結(jié)果的一致性

? 真空抽濾

? 常用的方法（目前）

? 不支持高1性能的柱子（微粒經(jīng)填料）

? 不適用粘稠樣本和粘性樣品

? 流速不均一

? 離心

? 不常規(guī)，不適用于體積超過(guò)100微升的樣品

? 正壓

? 變得越來(lái)越普遍

? 流速方便控制且均一

? 提供更高的壓力

? 更容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化

柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢？原來(lái)也討論過(guò)這個(gè)問(wèn)題，我也拆下來(lái)清洗過(guò)，但我看到柱前段的污染更甚，于是就用刀片刮了刮，然后把清洗好的篩板安裝上去。問(wèn)題解決了，但使用壽命會(huì)不會(huì)減少呢？

答：柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。因?yàn)榧尤肽愎瘟诵┨盍?，那么微觀的塔板數(shù)就少了。假入你刮得不多，僅表面，可能就是一些臟物，所以，問(wèn)題解決。但是今后還會(huì)有同樣問(wèn)題，再掛，那么不小心刮，影響柱效。建議還是裝一個(gè)預(yù)柱。