親和柱原理介紹

親和層析（IAC）可稱為色譜技術(shù)，是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復(fù)雜的待測(cè)樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價(jià)結(jié)合，然后裝入小柱，將被測(cè)溶液流過(guò)親和柱，而非目標(biāo)化合物則沿柱流下，然后用洗脫緩沖液洗脫抗原（被測(cè)物），從而得到純化的抗原（被測(cè)物），收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計(jì)檢測(cè)。

真菌復(fù)合親和柱

復(fù)合柱規(guī)格：除IAC208/IAC214為6ml外，其余都為3ml，

IAC201AZ-玉米赤霉烯酮2合1親和柱 

IAC202AO-赭曲霉A 2合1親和柱 

IAC203AOZ-赭曲霉A-玉米赤霉烯酮3合1親和柱 

IAC204ADOZ-嘔吐-赭曲霉A-玉米赤霉烯酮 4合1親和柱 

IAC205DZ嘔吐-玉米赤霉烯酮  2合1親和柱 

IAC206OZ赭曲霉A-玉米赤霉烯酮2合1親和柱 

IAC207ADZ-嘔吐-玉米赤霉烯酮3合1親和柱 

IAC208ADOFTZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-T2-玉米赤霉烯酮6合1親和柱

IAC209 DTZ 嘔吐-T2-玉米赤霉烯酮3合1

IAC210 ADOFZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-玉米赤霉烯酮5合1親和柱

IAC211 ADOFTZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-T2-玉米赤霉烯酮-雜色曲霉7合1親和柱

IAC212 FZ伏馬-玉米赤霉烯酮2合1親和柱

IAC213 ADFZ-嘔吐-伏馬玉米赤霉烯酮4合1親和柱

親和柱——親和層析的分離原理

生物體中許多大分子化合物具有與其結(jié)構(gòu)相對(duì)應(yīng)的專一分子可逆結(jié)合的特性，如抗原與抗體，酶與底物或抑制，與受體等，這種結(jié)合往往是專一的而且是可逆的，生物分子間的這種結(jié)合力稱為親和力，親和層析的分離原理簡(jiǎn)單地說(shuō)就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中的一個(gè)固定在不溶性的基質(zhì)（也稱載體）上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱為配體，配體與基質(zhì)共價(jià)結(jié)合，構(gòu)成親和層析的固定相，稱為親和吸附劑，蛋白質(zhì)的生物特異性可以幫助選擇特異性的配體，一般是目的蛋白質(zhì)與配體結(jié)合而不吸附雜質(zhì)。蛋白質(zhì)吸附后再利用洗脫液的快速變換和加入競(jìng)爭(zhēng)劑的方法進(jìn)行洗脫。

親和柱——親和層析的原理

通常，在開(kāi)始親和層析前需要預(yù)先進(jìn)行全細(xì)胞提取物的粗制，例如細(xì)胞裂解液，生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

首先將固定相裝入帶有流動(dòng)相的色譜柱中，其中含有某類(lèi)特定的生物大分子（從DNA到蛋白質(zhì)，取決于實(shí)驗(yàn)需求）。等待一段時(shí)間使兩相充分混合，隨后將洗滌緩沖液倒入色譜柱中。洗滌緩沖液通過(guò)破壞非目標(biāo)生物分子與固定相的較弱結(jié)合來(lái)去除非目標(biāo)生物分子。目標(biāo)生物分子對(duì)固定相具有較高的親和力，因此能夠保持與固定相的結(jié)合，而不會(huì)被洗滌緩沖液沖走。然后將洗脫緩沖液倒入含有剩余目標(biāo)生物分子的色譜柱中。洗脫緩沖液比洗滌緩沖液，能夠從更大程度上減弱靶生物分子與固定相之間的相互作用，從而洗脫靶生物分子。洗脫得到的溶液包含洗脫緩沖液和目標(biāo)分子，稱為洗脫液。

固定相一般是凝膠基質(zhì)，常見(jiàn)的有瓊脂糖。為了防止目標(biāo)分子與配體結(jié)合過(guò)程中的空間干擾或重疊，首先將含有烴鏈的抑制連接到瓊脂糖珠（固體支持物）上。這種具有烴鏈的抑制通常被稱為瓊脂糖珠和靶分子之間的間隔基。