ELISA試劑盒的組成結構

1、 操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

此IBL試劑盒能用于小鼠清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測。

ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法

標準曲線線性不佳，或是平行性不好。

a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內)。

b.原因：操作時間拖太久。

解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。

c.原因：微孔間相互污染。

解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。

解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。

f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。

解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。

Elisa試劑盒技術原理

(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標記。

(2). 結合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。

(3). 酶標記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或起反應。再加入酶標記的抗原或，也通過反應而結合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以反應為基礎，將抗原、的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

ELISA試劑盒-ELISA檢測原理介紹

酶聯(lián)吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指將可溶性的抗原或結合到聚乙烯等固相載體上，利用抗原結合專一性進行反應的定性和定量檢測方法。它是應用比較多的一種酶技術。ELISA試劑盒（ELISAKits）已成為藥品和植物病理學研究中的常用診斷工具，是檢測組織提取液和細胞培養(yǎng)液中目標/抗原的理想工具，也是重要的質量控制手段。