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發(fā)布時間:2021-08-01 18:56  
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什么是制備液相色譜儀?
制備液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關聯(lián)的。然而并不是以設備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法(如蒸餾、萃?。┍容^,制備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加,制備型液相色譜儀應用的領域也在迅速的擴大發(fā)展。
什么是液相色譜?
液相色譜(liquid chromatography,LC)是一種色譜技術,用于分離和分析溶液中混合物的化學成分,以確定是否存在或不存在特定成分,如果存在,則存在多少。我們中的許多人會從上學開始就熟悉平面LC的形式,在濾紙上打上黑色墨水標記,將一端浸入水中,然后觀察墨水中的成分顏色是否分開。但是,分析應用中使用的大多數(shù)LC均基于柱色譜法,這將是本文的重點。顧名思義,液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是使用高色譜分辨率進行分離的高的性能分析。分離的組分也可以在檢測后使用餾分收集器分離,作為純化的手段。HPLC有多種不同的配置,可用于分離分子量從半揮發(fā)性小分子到幾萬千道爾頓的大蛋白生物分子的溶解組分。液相色譜法是一種非常流行的分析技術,廣泛用于環(huán)境監(jiān)控,農(nóng)業(yè)領域。
經(jīng)常有客戶疑惑,柱子是否可以反沖?
什么樣的柱子可以反沖?什么不可以?
反沖后是正著用,還是反著用?
一般的正相反相柱應該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖,不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖后還是正著用比較好,以免柱子的兩頭都被污染。月旭的絕大多數(shù)色譜柱都是可以反沖,并且我們一直提倡的是:正向使用,反向沖洗。
液相色譜儀分類
液相色譜儀依據(jù)樣品在固定相和流動相分離過程的物理化學原理,可分為以下五種。
1、吸附色譜:
用固體吸附劑作固定相,以不同極性溶劑作流動相,依據(jù)樣品中各組分在吸附劑上吸附性能的差別來實現(xiàn)分離。
2、分配色譜:
用載帶在固相基體上的固定液作固定相,以不同極性溶質(zhì)作流動相,依據(jù)樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來實現(xiàn)分離。根據(jù)固定相和液體流動相相對極性的差別,又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。當固定相的極性大于流動相的極性時,可稱為正相分配色譜或簡稱正相色譜;若固定相的極性小于流動相的極性時,可稱為反相分配色譜或簡稱反相色譜。
3、離子色譜:
用微粒離子交換劑作固定相,以具有一定pH值的緩沖溶液作流動相,依據(jù)離子型化合物中各離子組分與離子交換劑上表面帶電荷基團進行可逆性離子交換能力的差別而實現(xiàn)分離。
4、體積排阻色譜:
用化學惰性的多孔性凝膠作固定相,按固定相對樣品中各組分分子體積排阻滯作用的差別來實現(xiàn)分離。以水溶液作流動相的體積排阻色譜柱,稱為凝膠過濾色譜;以有作流動相的體積排阻色譜法,稱為凝膠滲透色譜法。
5、親和色譜:
以在不同基體上,鍵合多種不同特性的配位體作固定相,用具有不同pH值的緩沖溶液作流動相,依據(jù)生物分子與基體上鍵聯(lián)的配位體之間存在特異性親和作用能力的差別,而實現(xiàn)對具有生物活性的生物分子的分離。