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發(fā)布時間:2021-08-12 11:39  

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測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的離不開的原料,如抗原,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而則為純化抗原動物后獲得的多和使用雜交瘤技術(shù)得到的單,而抗原或的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或及其酶結(jié)合物等測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。



lisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。



雙夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。



間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二(抗)0.1ml;5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;6.’后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。