大腸菌群檢驗(yàn)方法

國家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法，即：乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、分離培養(yǎng)和證實(shí)試驗(yàn)?！　∪樘前l(fā)酵試驗(yàn)：樣品稀釋后，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。

　　分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。

　　證實(shí)試驗(yàn)：挑取平板上的ke疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

　　報(bào)告：根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報(bào)告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

在現(xiàn)在已知的大腸桿菌檢測方法中，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的先進(jìn)方法。這也就直觀的影響到了很多檢測人員對于酶底物法檢測水中大腸桿菌的方法的掌握，因?yàn)槿绻褂脗鹘y(tǒng)的多管發(fā)酵法和濾膜法的話，整體的操作過程比較繁瑣，并且是試驗(yàn)環(huán)境要求比較高。檢測時(shí)間比較長，所以酶底物法是現(xiàn)在追捧的檢測的水中大腸桿菌的方法。

那其實(shí)從整個(gè)客觀角度來說，相對于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高，檢測時(shí)間可減少到24小時(shí)，在日常水樣監(jiān)測及應(yīng)急監(jiān)測中具有很好的應(yīng)用前景，可及時(shí)檢測，預(yù)防，較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。酶底物法有商品化試劑供應(yīng)，實(shí)驗(yàn)操作簡便，無需確認(rèn)試驗(yàn)，可同時(shí)檢測水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌。

大腸桿菌是寄生在任何許多動物體內(nèi)，主要是腸道內(nèi)的細(xì)菌，并且可以致病，因此有必要做好大腸桿菌檢測。大腸桿菌對人和動物有病原性，尤其對嬰兒和幼畜（禽），常引起嚴(yán)重腹瀉和bai血癥，它是一種普通的原核生物，根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為6類：腸致病性大腸桿菌（EPEC）、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸chu血性大腸桿菌（EHEC）、腸黏附性大腸桿菌（EAEC）和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌（G-）。

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大腸菌群分布較廣，在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明，大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。