廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷(xiāo)售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開(kāi)拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)、一個(gè)z專(zhuān)業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和。D含碳量含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)?？茖W(xué)化、精細(xì)化、專(zhuān)業(yè)化。服務(wù)理念：我們有著專(zhuān)業(yè)的銷(xiāo)售及售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的整套方案、有著的售前與盡心的售后服務(wù)和技術(shù)支持。我們不斷追求，通過(guò)自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。 我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。公司主營(yíng)：Luna色譜柱，美國(guó)飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類(lèi)手性色譜柱等等

液相色譜柱使用問(wèn)題解析

1對(duì)于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？為什么要這樣做？

答：新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽，尤其重要。推薦色譜柱——HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱(由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。

如果要加快平衡時(shí)間，把前面用來(lái)平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。

2測(cè)定多肽，一般采用什么柱子？流動(dòng)相是yi腈和水，還有微量的TFA。特別是像類(lèi)似三肽的短肽，應(yīng)該怎么選擇柱子？

答：分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測(cè)定，也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。

lux （手性色譜柱）

完整的手性分離方案

從分析到制備級(jí)別，簡(jiǎn)化手性分離，均是明智的投入！

LUX手性柱和填料通過(guò)以下三種方法簡(jiǎn)化分離過(guò)程：

?獨(dú)特和傳統(tǒng)的固定相相結(jié)合，增加手性篩選的成功率

?完全兼容于正相體系、極性有機(jī)相體系、超臨界流體

?色譜及反相體系的方法-無(wú)需換柱！

使用Lux?篩選工具包

可以分離92%*的對(duì)映體

現(xiàn)有5種獨(dú)特的固定相可選擇！

1.Amylose-2:獨(dú)特的氯代固定相擴(kuò)大了對(duì)映體選擇性范圍；

2.Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性篩選的成功率；

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度。我們不斷追求，通過(guò)自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。

GeminipH 靈活性強(qiáng)的液相色譜柱

維生素 B3

色譜柱： Gemini 3 μm C18

規(guī)格： 100 x 4.6mm

貨號(hào)： 00D-4439-E0

流動(dòng)相： A：0.1% 甲酸的水溶液

B：jia醇

流速： 0.6mL/min

溫度： 22 °C

檢測(cè)： 電噴霧質(zhì)譜 (ESMS) (22 °C)

檢測(cè)器： SCIEX API 4000 系統(tǒng)

樣品： 1. 煙酰胺

2. 煙酸

TMP 和硫胺

色譜柱： Gemini 3 μm NX-C18

規(guī)格： 100 x 3.0mm

貨號(hào)： 00D-4453-Y0

流動(dòng)相： A：含 10% jia醇的 25mM Na2

HPO4

(pH 7.0)

B：含 70% jia醇的 25mM Na2

流速： 0.75mL/min

檢測(cè)： 熒光（激發(fā)：375 nm，發(fā)射：435 nm）（室溫）

樣品： 1. TMP

2. 硫胺

手性色譜柱

蛋白質(zhì)型：

蛋白質(zhì)型手性色譜柱屬于第5種類(lèi)型。5μm粒徑的藥典（歐洲藥典和美國(guó)藥典）方法在5μm壓強(qiáng)下可以為HPLC和PREPLC方法實(shí)現(xiàn)3μm或更佳的柱效比全多孔顆粒更優(yōu)的性能使用包含納米結(jié)構(gòu)技術(shù)的溶膠凝膠處理技術(shù)，在固態(tài)硅膠核上培養(yǎng)出均一穩(wěn)定的多孔外殼。分離依賴(lài)于疏水相互作用和極性相互作用。已經(jīng)有多種蛋白質(zhì)用于此類(lèi)手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白（α-Acid Glycoprotein，AGP），人xue清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA），牛xue清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）和卵類(lèi)粘蛋白（Ovomucoid，OV）。

α-酸性糖蛋白分子由181個(gè)氨基酸殘基和40個(gè)唾液酸（sialic acid）殘基構(gòu)成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性，等電點(diǎn)為2.7。含有兩個(gè)二硫鍵，性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價(jià)鍵合到硅膠上，制成手性色譜柱，可以分離許多化合物。

α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動(dòng)相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機(jī)相。Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性篩選的成功率。有機(jī)相shou選異bing醇，如達(dá)不到分離要求，可以嘗試yi腈，乙醇，jia醇或四氫fu喃。有機(jī)相的改變導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時(shí)的改變。色譜柱的負(fù)載量至關(guān)重要，典型的負(fù)載量為0.02mg/ml的濃度樣品，進(jìn)樣20μl。pH 的改變對(duì)手性選擇性起關(guān)鍵作用，尤其是胺類(lèi)化合物。pH降低導(dǎo)致蛋白質(zhì)負(fù)電荷的降低，引起胺類(lèi)化合物保留時(shí)間減小，然而這意味著可以減小有機(jī)相比例，使選擇性增加，峰形改善。

通過(guò)調(diào)節(jié)有機(jī)相比例仍無(wú)法達(dá)到分離效果時(shí)，有時(shí)需用電荷調(diào)節(jié)劑。填充方法一般有4種①高壓勻漿法，多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充。但這可能引起蛋白結(jié)構(gòu)的yong久改變，這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有時(shí)也用到1，2 亞二醇，1，2丁醇和氯化鈉。溫度對(duì)分離也有影響，溫度增加保留時(shí)間，減小分離因子。

人xue清白蛋白（HSA）分子量為69,000，等電點(diǎn)為4.8。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時(shí),應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。蛋白中認(rèn)為存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)：華法令-氮雜普魯帕宗（warfarin-azapropazone）結(jié)合位點(diǎn)。流動(dòng)相中加入辛酸，采用人xue清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin也用人xue清白蛋白手性色譜柱得到了分離，流動(dòng)相組成為：100mM磷酸緩沖液pH7：yi腈：異bing醇 = 84：10：6。

牛xue清白蛋白（BSA）為球型蛋白，分子量為66,000，等電點(diǎn)為4.7。液相色譜儀的選擇液相色譜儀基質(zhì)的選擇大致遵循以下法則，硅膠基質(zhì)的填料被用于大部分的HPLC分析，尤其是小分子量的被分析物，聚合物填料用于大分子量的被分析物質(zhì)，主要用來(lái)制成分子排阻和離子交換柱。此蛋白為一個(gè)單氨基酸鏈，通過(guò)17個(gè)二硫鍵形成9個(gè)雙環(huán)。許多化合物通過(guò)牛xue清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定，一些有ji溶劑（如yi腈、jia醇）可使蛋白變性，因此使用起來(lái)要特別注意。

卵類(lèi)粘蛋白由蛋清中提取，分子量為55,000。它可分離大量的胺類(lèi)和酸類(lèi)化合物。

蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應(yīng)用。

蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應(yīng)用廣的色譜柱，但并不是效果z好的色譜柱。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。多糖類(lèi)手性柱，涂覆型三(3,5-二甲ben基氨基甲酸酯）纖維素手性色譜柱(COD柱)，適用于sheng物堿、β-受體拮抗劑、胺等化合物的拆分。我們不斷追求，通過(guò)自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。

Synergi選擇性液相色譜柱

Synergi Polar-RP

具有極性封尾的醚聯(lián)ben基色譜柱

pH 穩(wěn)定性： 1.5 – 7.0

粒徑： 2.5 μm、4 μm 和 10 μm

固定相： 具有極性封尾的醚聯(lián)ben基

應(yīng)用： 適用于極性和芳香族化合物的極端保留

優(yōu)勢(shì)： 利用含jia醇的流動(dòng)相改善酸性和堿性分析

物的峰形以及芳香族選擇性

LuxAMP 手性液相色譜柱

對(duì)尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對(duì)映體進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的手性分離

Lux 3μm AMP 是一款專(zhuān)為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開(kāi)發(fā)和測(cè)試的獨(dú)特液相色譜填料。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)映體確認(rèn)。

不受常見(jiàn)干擾物的影響

Lux 3μm AMP 的另一個(gè)顯著優(yōu)勢(shì)是，在分離ben丙胺和jia基ben丙胺對(duì)映體時(shí)不會(huì)受到下列常見(jiàn)的zhi療和成分的影響。此外，LuxAMP 色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對(duì)映體

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷(xiāo)售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。C顆粒粒徑粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降。公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置，定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。

與其他極性基團(tuán)修飾的 C18 色譜柱相比，Synergi Fusion-RP 的 MS 柱流失可忽略不計(jì)

所有色譜柱的條件：

規(guī)格： 150 x 4.6mm

流動(dòng)相： A：0.1% CH3

COOH 的水溶液

B：0.1% CH3

COOH 的jia醇溶液

梯度： 在 8 分鐘內(nèi)從 95:5 (A/B) 線性變成

5:95，保持 5 分鐘

流速： 0.5mL/min

檢測(cè)： Bruker-Daltonics Esquire 2000 IT

離子源：ESI

掃描速率：13000m/z/s

掃描范圍：50-1000

手性色譜柱知識(shí)介紹

由于形成包合物速度較慢，因此可能導(dǎo)致色譜峰峰形較差，同樣也影響了其在制備色譜中的應(yīng)用。環(huán)糊精固定相的選擇性取決分析物的分子大??；α-環(huán)糊精只能允許單ben基或萘基進(jìn)入，β-環(huán)糊精允許萘基及多取代的ben基進(jìn)入，γ-環(huán)糊精僅用于大分子萜類(lèi)。系統(tǒng)壓力高，可能會(huì)因溶劑泵中的過(guò)濾頭供液速度跟不上而導(dǎo)致氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，停機(jī)也應(yīng)該是因?yàn)闅馀葸M(jìn)入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過(guò)濾頭。β-環(huán)糊精手性固定相應(yīng)用范圍廣。Ibuprofen通過(guò)β-環(huán)糊精色譜柱得到分離，說(shuō)明了pH值對(duì)氫鍵的影響。當(dāng)流動(dòng)相的pH=7時(shí)，觀察不到拆分的跡象。pH=4時(shí)，可達(dá)到好的分離效果。通常分離氨基酸時(shí)，常采用低的pH值，以抑制酸性基團(tuán)的離子化，同時(shí)也增強(qiáng)氨基的質(zhì)子化。磷酸三乙胺鹽、yi酸三乙胺鹽證明對(duì)β-環(huán)糊精色譜柱來(lái)說(shuō)是很好的緩沖液。通常緩沖液是0.1%三乙胺溶液，用磷酸或醋酸調(diào)節(jié)到合適的pH值。高的流速會(huì)降低形成復(fù)合物的能力，低流速分離效果較好，0.5-1ml/min的流速z好。另外，增加緩沖液的濃度可以克服流速的影響，因?yàn)樗梢栽黾迎h(huán)糊精洞穴和流動(dòng)相的吸引力