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發(fā)布時間:2021-08-06 19:30  
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使用液相色譜時,堵、漏是常見的問題,這些問題大多是由于使用不當或不夠重視所致。液體泄漏問題較易發(fā)現(xiàn)和解決。液體泄漏原因概述如下:1、接頭處沒有緊固。2、連接處易損耗材變形或老化,為避免不必要的麻煩,需及時更換耗材,以免出現(xiàn)管線漏液或崩開也可能是peek頭在柱子里斷了。3、管件磨損嚴重導(dǎo)致漏液,如柱塞密封、進樣閥轉(zhuǎn)子密封等。躲藏"坑":防堵堵漏是一對孿生姐妹,常常相伴出現(xiàn),說完我們再來看看堵漏的問題。
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HPLC是從經(jīng)典的液相色譜方法發(fā)展而來,它以液體為流動相,并且采用了微粒細粒固定相的柱層析分離技術(shù)。它的分離機理與普通的柱色譜一樣,但填料更精細,需要高壓泵推動,柱效高,分析速度快。在液相色譜中,流動相也參與了組分的分離過程,其組成、比例和 pH值可以靈活調(diào)整,分離方式多樣。實踐中,對不同樣品進行分離,主要是通過改變流動相組成來調(diào)節(jié)樣品在色譜柱的保留程度和選擇性。HPLC技術(shù)自上世紀60年代出現(xiàn)以來,由于采用了高壓輸液泵、全多孔微粒填充柱和高靈敏度檢測器,實現(xiàn)了對樣品快速、、靈敏的分離檢測。HPLC技術(shù)的引入,使 HPLC吸收了經(jīng)典液相色譜的發(fā)展經(jīng)驗,大大提高了儀器的自動化水平和分析精度。目前采用微處理器控制的 HPLC系統(tǒng),不僅自動化程度高,而且可以控制儀器的操作參數(shù)(如溶劑梯度洗脫、流動相流量、柱溫、自動進樣、洗脫液收集、檢測器功能等),同時還可以縮放、疊加得到的色譜圖,并對保留的數(shù)據(jù)和峰高、峰面積進行處理等,為色譜分析工作者提供、全功能的分析工具。
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1.避免長菌夏天易滋生微生物或藻類,長時間如此使用,溶劑過濾頭、管道、脫氣器、比例閥、色譜柱等容易損壞,不僅維護費用高,而且影響實驗進度。小長假儀器長期不使用時,需將使用水相的管道換換,以防止細菌滋生。2.適當使用流動相移動相應(yīng)臨用現(xiàn)配、貼標簽、寫有效期、配置日期等。盡量用0.2μ的濾膜過濾含鹽的流動相,用0.45μ的濾膜過濾有機相,注意溶劑與濾膜的相容性。實驗時要注意梯度變化時流動相的可溶性,不可互溶的溶劑不能直接轉(zhuǎn)換,用異作過渡溶劑。注意緩沖鹽的流動相使用過渡,不直接使用有機相沖,避免鹽析,并注意清洗泵柱塞桿。對 Ch. P中磷酸肌酸鈉等度純鹽相實驗項目,建議哥哥小姐姐將配置好的流動相放入冰箱冷藏,半天后更換放置到室溫下的新流動相。其它等度條件水與有機相預(yù)混后上機,不要與泵比例閥在線混合。
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正確使用在常溫光照條件下,可聚合,緩慢聚合,這種聚合經(jīng)驗逐漸沉積在進口單向閥的寶石球上,影響泵的精度,因此在使用時要注意:●盡量現(xiàn)用現(xiàn)倒,勤換新。佳棕色瓶子裝,避免陽光直接照射?!癖3智鍧?,灰塵或其它雜質(zhì)可能成為形成聚合物的“凝核”。若閥已被聚合物所粘住,可用熱水-異沖洗管道,也可用超聲波處理,可溶解聚合物。
被測樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個來源是試樣。有些實驗室把樣品放入自動采樣盤(或人工進樣)之前,首先要經(jīng)過一個0.45μ m針筒式過濾器過濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過程要注意一點:你用了針筒過濾器,不可能100%獲得經(jīng)過過濾器測試的樣品,總會有或多或少的損失。損失源于以下幾個方面:過濾器過濾膜的吸附、過濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。
如有丟失,過濾后的液體中被測物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同?這通常需要通過實驗加以證實。確定此步驟會增加工作量和成本。過濾是一種消耗,每臺過濾器的價格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時,由于底物大多比較復(fù)雜,因此過濾這一步就成為的步驟。實踐分析工作中,一般檢測每組樣品都要配外標、加回收或質(zhì)控樣品,所以只要檢測得到的信噪比達到檢出限要求,就可以認為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。