等溫核酸試劑盒

TwisAmp exo

說明TwistAmp? exo 試劑盒可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光 DNA 擴(kuò)增。若想要以均相形式將 TwistDx RPA 擴(kuò)增技術(shù)與 TwistDx 熒光 TwistAmp?&nb

說明

TwistAmp? exo 試劑盒可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光 DNA 擴(kuò)增。若想要以均相形式將 TwistDx RPA 擴(kuò)增技術(shù)與 TwistDx 熒光 TwistAmp? exo 探針結(jié)合使用，則推薦使用本產(chǎn)品。用戶只需提供引物、探針和模板。

非常適用于：實(shí)時(shí)熒光 DNA 檢測

重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）技術(shù)，是近幾年出現(xiàn)的有望替代PCR的新的核酸擴(kuò)增技術(shù)。RPA技術(shù)由Piepenburg等于2006年創(chuàng)立，該技術(shù)基于重組酶聚合酶介導(dǎo)的擴(kuò)增原理，體外模擬生物體內(nèi) DNA 復(fù)印，在恒溫條件下即可對目的片段進(jìn)行擴(kuò)增，特別適用于快速檢測，特別適用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，已被成功應(yīng)用到多種病原的快速檢測上。

核酸試劑盒

RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應(yīng)溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成，對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過程進(jìn)行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。RPA擴(kuò)增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴(kuò)增所需的所有試劑，我們只要準(zhǔn)備好引物和模板就行。擴(kuò)增結(jié)果可以通過凝膠電泳進(jìn)行終點(diǎn)檢測，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個(gè)基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針，就可以實(shí)現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。舉例來說，TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III，能實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應(yīng)終點(diǎn)的擴(kuò)增子總量有所減少，適合獲得強(qiáng)熒光信號進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析，不適合終點(diǎn)檢測(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來，可以一步實(shí)現(xiàn)RNA模板的實(shí)時(shí)擴(kuò)增。

“強(qiáng)烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”，她表示，“病毒核酸檢測是確診新型冠狀病毒無創(chuàng)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，然而檢測結(jié)果‘CT陽性、核酸陰性’的結(jié)果，可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測特異性高、敏感性偏低，不排除存在部分假陰性?！?

在現(xiàn)實(shí)中，也出現(xiàn)了核酸試劑盒檢測數(shù)次陰性，卻確診為新冠的案例。