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發(fā)布時間:2021-09-09 19:02  

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超大孔單分散聚合物層析介質(zhì)用于病毒分離純化

傳統(tǒng)生物層析介質(zhì)不能有效用于病毒分離純化很主要的原因是其孔徑太小,病毒不能擴散到傳統(tǒng)層析介質(zhì)的內(nèi)孔里,因此可及比表面積低,吸附載量低,而超大孔單分散層析介質(zhì)由于粒徑均勻,孔徑大(>400 納米)因此病毒可以有效的擴散到孔內(nèi)部空間,使得靜態(tài)吸附載量大幅度提升。超大孔結(jié)構(gòu)還可以有效降低病毒與填料表面配基之間多位點結(jié)合,避免亞基的解聚,使得病毒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性得到大幅度的提高。另外超大孔聚合物層析介質(zhì)用于病毒及類病毒(疫l苗)分離純化的優(yōu)點是其分離模式與傳統(tǒng)生物制藥層析分離純化方法基本一樣,容易放大生產(chǎn),重復(fù)性好。但超大孔層析介質(zhì)制備技術(shù)難度大,且其機械強度差,耐壓性差,容易破碎,導(dǎo)致篩板堵塞,壓力升高等缺點。雖然納微已經(jīng)可以制備孔徑大于高達800納米的超大孔徑聚合物微球,但要滿足病毒大規(guī)模分離純化,還需要進一步解決超大孔微球機械強度問題。

以下為納微超大孔徑DEAE離子交換層析介質(zhì)在流l感病毒(H5N2)純化中的數(shù)據(jù),結(jié)果顯示超大孔介質(zhì)對流l感病毒的分離純化比傳統(tǒng)層析介質(zhì)具有明顯的優(yōu)勢。


1、常用的定量分析方法:標(biāo)準(zhǔn)曲線法、直接定量(外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法)

2、層析柱主要有:弗羅里硅土柱、氧化鋁柱、硅膠柱、活性碳柱、其他填料層析柱子

3、液相色譜的特點是:、高速、高靈敏度、高度自動化

4、氣相色譜儀常用的檢測器有:火焰離子化檢測器(FID)、火焰光度檢測器(FPD)

電子捕獲檢測器(ECD)、氮磷檢測器(NPD)、原子發(fā)射檢測器

5、檢測器的評價指標(biāo):噪聲、漂移、靈敏度、線性范圍與動態(tài)范圍

6、氣相色譜柱有:填充柱、毛細管柱(開管型和填充型)


層析簡介

層析(chromatography)是“色層分析”的簡稱。利用各組分物理性質(zhì)的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法。有吸附層析、分配層析兩種。一般用于有機化合物、金屬離子、氨基酸等的分析。層析利用物質(zhì)在固定相與流動相之間不同的分配比例,達到分離目的的技術(shù)。層析對生物大分子如蛋白質(zhì)和核酸等復(fù)雜的有機物的混合物的分離分析有極高的分辨力。