ELISA試劑盒的制備方法

包括以下步驟：

1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選；

2)抗原的制備；

3)采集；

4)間接ELISA方法的建立；

5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證；

6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證；

7)對(duì)屠宰場(chǎng)進(jìn)行臨床檢測(cè)。該方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測(cè)，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制豬戊病毒的流行和阻斷戊病毒由豬向人傳播。

ELISA試劑盒的操作方法——間接法

以下是北京中檢維康生物技術(shù)有限公司為您一起分享的內(nèi)容，北京中檢維康生物技術(shù)有限公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒，歡迎新老客戶(hù)蒞臨。

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；

4.（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.然后用DDW洗滌。

其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

Elisa試劑盒的注意事項(xiàng)

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時(shí)）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請(qǐng)按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無(wú)培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì)，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí)，常常會(huì)先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成培養(yǎng)液。

Elisa試劑盒——Elisa實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

現(xiàn)白板，陽(yáng)性對(duì)照不顯色 

1  顯色液變質(zhì) 更換新的顯色液

2  洗滌液配制有誤 請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數(shù)配制

3  未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 注意不要漏加

4  終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽

5  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法錯(cuò)誤/或標(biāo)準(zhǔn)品有問(wèn)題 請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)所示配置說(shuō)明書(shū)，注意單位和稀釋倍數(shù)

6  不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用 建議使用同批次試劑盒。不能混用不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑。