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發(fā)布時間:2020-11-29 07:17  
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Tris試劑桶裝,在病毒保存液中,加入Tris首先可以維持采樣樣本的pH值,起到生物緩沖劑的效果,病毒及其核酸對環(huán)境pH是比較敏感的,核酸(DNA、RNA)在酸性溶液中易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。而Tris三羥,PH緩沖范圍:7.0-9.0,能夠維持待提取樣品裂解后釋放的核酸的穩(wěn)定性,以避免核酸的降解,提高核酸的濃度和純度,有利于提高核酸的質(zhì)量,保證后續(xù)核酸檢測分析等操作的準確性。
生物緩沖液Tris是一種氨基獨一不含鈉的氨基緩沖堿,不會給體系中帶入鈉、鉀離子,不影響滲透壓,必要時也可以加入生理鹽水調(diào)節(jié)鹽平衡。其對生物化學過程的影響很小,也不會與鈣、酶及重金屬離子生成沉淀,不影響激酶、磷酸酶、脫氫酶等多種酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白質(zhì)相關(guān)的實驗,常用緩沖體系有:Tris-HCl緩沖液、TBS緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、Tris甘氨酸緩沖液、Tris磷酸緩沖液等。需要注意的是Tris的pH值受溫度影響較大,要注意控制好溫度;Tris溶液顯堿性,會吸收CO2,要注意密封。
02、緩沖溶液的選擇與計算
為了保證緩沖溶液有足夠強的緩沖能力,在配制緩沖溶液時,需要做到:
為使共軛酸堿對的濃度比接近于1,應根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。
例如,生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4 )=9.25)。