原位雜交；原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交！

使用DNA或者RNA探針來(lái)檢測(cè)與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。

以菌落原位雜交為例：對(duì)分散在若干個(gè)瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進(jìn)行克8隆篩選時(shí)，可采用本方法。將這些菌落歸并到一個(gè)瓊脂主平板以及已置于第二個(gè)瓊脂平板表面的一張硝5酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間后，對(duì)菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。

就DNA探針和RNA探針的比較，DNA探針在雜交過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)探針雙鏈之間退火的可能，也更傾向于在溶液中形成大分子的探針聚合體，從而影響其滲透能力。而RNA 探針的應(yīng)用，將提高DNA-RNA雜交子的熱穩(wěn)定性。

Tips：RNA探針因其單鏈、高分子結(jié)合力、可適應(yīng)高溫雜交的特性，其檢測(cè)特異性和靈敏度均優(yōu)于DNA探針。常用的RNA探針標(biāo)記方法為構(gòu)建質(zhì)粒后進(jìn)行轉(zhuǎn)率合成。通過(guò)PCR擴(kuò)增的方法，可以更方便地進(jìn)行RNA探針的制備；RNA探針合成后，還需驗(yàn)證其對(duì)目標(biāo)片段檢測(cè)的靈敏度和特異性。

原位雜交組織（或細(xì)胞）化學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)稱原位雜交（In situ hybridization, ISH）是應(yīng)用已知堿基順序并帶有標(biāo)記物的核酸探針與組織細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸，按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行特異性結(jié)合，形成雜交體，然后用與標(biāo)記物相應(yīng)的檢測(cè)系統(tǒng)，通過(guò)組織化學(xué)或免3疫組織化學(xué)方法在核酸原有位置進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位、定性和定量研究。為分子水平研究細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)及有關(guān)細(xì)胞5因子的調(diào)控提供了有效的工具?？梢暈榻M織化學(xué)與免3疫組織化學(xué)的重大突破。

原位雜交不需要從組織中提取核酸，對(duì)于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保護(hù)組織和細(xì)胞的形態(tài)，更能準(zhǔn)確地反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。

顯色原位雜交 (CISH)

顯色原位雜交 (CISH) 能讓您利用組織學(xué)實(shí)驗(yàn)室中已經(jīng)存在的方法在組織形態(tài)學(xué)背景下獲取遺傳信息。 我們提供用于CISH分析的CISH DNA探針和關(guān)鍵試劑。

熒光原位雜交 (FISH)

多重?zé)晒庠浑s交 (FISH) 能讓您利用單一樣本同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)并直觀顯示共定位情況。 使用不同光譜的熒光基團(tuán)標(biāo)記每種不同的雜交探針，這種方法能讓您在單一樣本中解析多種遺傳成分或多基因表達(dá)模式，并提供多色直觀顯示。