制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎？

目前，很多客戶的要求都傾向于買一臺液相能同時解決制備和分析的所有問題，那就相當(dāng)OK。這樣的客戶大多是科研經(jīng)費緊張，好不容易批下來點錢，不想都花在后期純化和分析上，所以盡量二合一。

在我看來，分析液相和制備液相是通用的，只是精度的差別問題。比如，分析的液相一般流速在0.1～10mL/min，活塞的一個沖程大概是10μL，而普通的制備液相一般都是10～100mL的流速，因此活塞桿的尺寸也會變大，一個沖程差不多是100μL；流速的精度相對來說就差了很多。流速大了，管路也相應(yīng)的粗了不少，以降低高流速帶來的背景壓力；但這樣的儀器用于分析的話，柱后的擴(kuò)散現(xiàn)象相當(dāng)?shù)膮柡Γ词乖谏V柱上達(dá)到基線分離的兩個峰，由于柱后擴(kuò)散的作用，到達(dá)檢測器的時候，差不多又會合到一起了；另外就是檢測器的差異，主要是檢測池的大小和狹縫的大小不同帶來的靈敏度的不同。制備儀器一般靈敏度是分析的1/20，以保證大量進(jìn)樣后，不會超過量程太多而平頭，分不清到底分沒分開了。

倒是有個折中的辦法，就是買分析型的液相，然后接個半制備的色譜柱。半制備就是直徑一厘米的柱子，流速5mL以內(nèi)，因此這個分析液相能達(dá)到；進(jìn)樣量大約是分析柱的10～20倍，檢測器可能會平頭，沒關(guān)系，換個波長，找個吸收較弱的波長當(dāng)檢測波長就OK了，不是大量制備的話，我想基本可以滿足需要了。

工業(yè)制備色譜

工業(yè)色譜又稱制備色譜。利少{J組分的差速遷移而實現(xiàn)I.業(yè)規(guī)?；旌衔锓蛛x的方法它包括一個流動相(被分離的氣相或液相)和一個固定相。兩相在色譜柱r}，進(jìn)行接觸，在色譜柱‘l，流動相沿固定相流動，由」幾混合物中各組分被固定相滯流程度不同，它們隨流動相移動的速度就不同，因而可使各組分.4.相分離。根據(jù)流動相的不}.可，可分為}L相色譜與液相色譜兩類。根據(jù)固定相的類型，可分為吸附色譜、分配色iH離子交換色譜、親和色潛‘排I}}L色譜五類。上業(yè)色譜可分離選擇性系數(shù)非常接近的組分，它適用于熱敏N}物質(zhì)的分離，對制備高純物質(zhì)特別有效

蛋白質(zhì)是具有一定構(gòu)象(空間結(jié)構(gòu))的生物大分子:其一級結(jié)構(gòu)是形成肽鏈的氨基酸序列(數(shù)目、種類、順序)，是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ);在一級結(jié)構(gòu)水平上，部分肽鏈發(fā)生卷曲和折疊，形成其二級結(jié)構(gòu)，這種卷曲和折疊是靠肽鏈中的羰基與氨基之間的氫鍵維持的:在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，多肽鏈再盤繞和折疊，形成三維空間形態(tài)，即為蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu):而蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)是指同一蛋白質(zhì)中各條肽鏈之間的相互關(guān)系。

蛋白質(zhì)的特點使得其分離過程與傳統(tǒng)化工分離過程有著極為不同的特點:(1)分離對象是具有特定的生物活性的生物大分子產(chǎn)品，分離過程設(shè)計中不恰當(dāng)?shù)奈锢砗突瘜W(xué)環(huán)境等(如溫度、PH值、緩沖液選擇、、攪拌和剪切力等)皆有可能引起其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而使之失活;(2)由于發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)液或勻漿液中，我們所需要的目標(biāo)產(chǎn)物往往存在于含有許多性質(zhì)十分相似的雜質(zhì)的稀溶液中，如何從這樣一種復(fù)雜的稀溶液中經(jīng)濟(jì)有效地提取產(chǎn)物是生物分離技術(shù)面臨的重大課題;(3)從衛(wèi)生和安全角度出發(fā)，對于用基因工程產(chǎn)品，有著極高的純度和同一性要求，對其中的有害雜質(zhì)去除率要求極高，對分離設(shè)備材質(zhì)和分離過程中引入的分離介質(zhì)也有著嚴(yán)格的限制。