蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究

隨著人類基因組計(jì)劃的完成,近年來生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn).晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對(duì)于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測(cè)定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展，蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡(jiǎn)要的概述,同時(shí)簡(jiǎn)單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。

新型蛋白質(zhì)結(jié)晶板

本實(shí)用新型公開了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板,包括頂部結(jié)晶板和下端結(jié)晶板,所述頂部結(jié)晶板安裝固定在下端結(jié)晶板的上端位置上,所述頂部結(jié)晶板的上端中間設(shè)置有陣列凹槽,通過結(jié)晶板外殼,內(nèi)部儲(chǔ)槽和滴液凹槽所組成的三孔結(jié)晶板可以很好的滿足特定的使用需要,三孔結(jié)晶板的結(jié)晶板外殼連接在頂部結(jié)晶板上,從而可以很好的固定連接住。

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蛋白質(zhì)晶體板

因而形核劑的使用對(duì)于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題.多孔微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子的吸附作用有利于無序蛋白質(zhì)分子團(tuán)簇的形成,進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)形核.添加多孔微球不但可以增加結(jié)晶條件篩選數(shù)。

綜述了雜質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)晶體生長影響研究領(lǐng)域的進(jìn)展情況, 對(duì)可能的雜質(zhì)來源以及雜質(zhì)對(duì)結(jié)晶過程的影響進(jìn)行了介紹,重點(diǎn)介紹了和結(jié)晶蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)分子的影響, 包括晶體成核、生長形態(tài)、表面形貌、生長動(dòng)力學(xué)、質(zhì)量等,以及雜質(zhì)在晶體中的重新分配。

蛋白結(jié)晶板

盡管近些年來在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展,獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個(gè)主要瓶頸問題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個(gè)部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進(jìn)行晶體生長的時(shí)候,直接將蛋白質(zhì)溶液加入'干母液'中,從而產(chǎn)生一個(gè)固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡(jiǎn)單、快速,而且降低了對(duì)蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。