廣州聯(lián)方實驗器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué)，歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強不息、開拓進取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個、一個z專業(yè)的一站式實驗室采購平臺，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和。D含碳量含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)?？茖W(xué)化、精細化、專業(yè)化。服務(wù)理念：我們有著專業(yè)的銷售及售后服務(wù)團隊，可以為您提供實驗室建設(shè)的整套方案、有著的售前與盡心的售后服務(wù)和技術(shù)支持。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標準物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材，是的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務(wù)實、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。 我們有及時的送貨服務(wù)，準確而快捷地滿足您的需要。公司主營：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等等

液相色譜柱使用問題解析

1對于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護？為什么要這樣做？

答：新柱活化，實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽，尤其重要。推薦色譜柱——HP-SAX強陰離子交換色譜柱(由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7。因為分子量高的物質(zhì)分子，擴散速度慢，平衡所需時間也相應(yīng)較長。具體平衡方式也很簡單，多進幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩(wěn)定，再進行正式進樣測定。

如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進樣多針。用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。

2測定多肽，一般采用什么柱子？流動相是yi腈和水，還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽，應(yīng)該怎么選擇柱子？

答：分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定，也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。

lux （手性色譜柱）

完整的手性分離方案

從分析到制備級別，簡化手性分離，均是明智的投入！

LUX手性柱和填料通過以下三種方法簡化分離過程：

?獨特和傳統(tǒng)的固定相相結(jié)合，增加手性篩選的成功率

?完全兼容于正相體系、極性有機相體系、超臨界流體

?色譜及反相體系的方法-無需換柱！

使用Lux?篩選工具包

可以分離92%*的對映體

現(xiàn)有5種獨特的固定相可選擇！

1.Amylose-2:獨特的氯代固定相擴大了對映體選擇性范圍；

2.Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性篩選的成功率；

廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標準物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務(wù)實、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務(wù)，準確而快捷地滿足您的需要。

GeminipH 靈活性強的液相色譜柱

維生素 B3

色譜柱： Gemini 3 μm C18

規(guī)格： 100 x 4.6mm

貨號： 00D-4439-E0

流動相： A：0.1% 甲酸的水溶液

B：jia醇

流速： 0.6mL/min

溫度： 22 °C

檢測： 電噴霧質(zhì)譜 (ESMS) (22 °C)

檢測器： SCIEX API 4000 系統(tǒng)

樣品： 1. 煙酰胺

2. 煙酸

TMP 和硫胺

色譜柱： Gemini 3 μm NX-C18

規(guī)格： 100 x 3.0mm

貨號： 00D-4453-Y0

流動相： A：含 10% jia醇的 25mM Na2

HPO4

(pH 7.0)

B：含 70% jia醇的 25mM Na2

流速： 0.75mL/min

檢測： 熒光（激發(fā)：375 nm，發(fā)射：435 nm）（室溫）

樣品： 1. TMP

2. 硫胺

手性色譜柱

蛋白質(zhì)型：

蛋白質(zhì)型手性色譜柱屬于第5種類型。5μm粒徑的藥典（歐洲藥典和美國藥典）方法在5μm壓強下可以為HPLC和PREPLC方法實現(xiàn)3μm或更佳的柱效比全多孔顆粒更優(yōu)的性能使用包含納米結(jié)構(gòu)技術(shù)的溶膠凝膠處理技術(shù)，在固態(tài)硅膠核上培養(yǎng)出均一穩(wěn)定的多孔外殼。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經(jīng)有多種蛋白質(zhì)用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白（α-Acid Glycoprotein，AGP），人xue清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA），牛xue清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）和卵類粘蛋白（Ovomucoid，OV）。

α-酸性糖蛋白分子由181個氨基酸殘基和40個唾液酸（sialic acid）殘基構(gòu)成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性，等電點為2.7。含有兩個二硫鍵，性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價鍵合到硅膠上，制成手性色譜柱，可以分離許多化合物。

α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機相。Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性篩選的成功率。有機相shou選異bing醇，如達不到分離要求，可以嘗試yi腈，乙醇，jia醇或四氫fu喃。有機相的改變導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時的改變。色譜柱的負載量至關(guān)重要，典型的負載量為0.02mg/ml的濃度樣品，進樣20μl。pH 的改變對手性選擇性起關(guān)鍵作用，尤其是胺類化合物。pH降低導(dǎo)致蛋白質(zhì)負電荷的降低，引起胺類化合物保留時間減小，然而這意味著可以減小有機相比例，使選擇性增加，峰形改善。

通過調(diào)節(jié)有機相比例仍無法達到分離效果時，有時需用電荷調(diào)節(jié)劑。填充方法一般有4種①高壓勻漿法，多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充。但這可能引起蛋白結(jié)構(gòu)的yong久改變，這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有時也用到1，2 亞二醇，1，2丁醇和氯化鈉。溫度對分離也有影響，溫度增加保留時間，減小分離因子。

人xue清白蛋白（HSA）分子量為69,000，等電點為4.8。保護柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時,應(yīng)考慮更換保護柱。蛋白中認為存在兩個結(jié)合位點：華法令-氮雜普魯帕宗（warfarin-azapropazone）結(jié)合位點。流動相中加入辛酸，采用人xue清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin也用人xue清白蛋白手性色譜柱得到了分離，流動相組成為：100mM磷酸緩沖液pH7：yi腈：異bing醇 = 84：10：6。

牛xue清白蛋白（BSA）為球型蛋白，分子量為66,000，等電點為4.7。液相色譜儀的選擇液相色譜儀基質(zhì)的選擇大致遵循以下法則，硅膠基質(zhì)的填料被用于大部分的HPLC分析，尤其是小分子量的被分析物，聚合物填料用于大分子量的被分析物質(zhì)，主要用來制成分子排阻和離子交換柱。此蛋白為一個單氨基酸鏈，通過17個二硫鍵形成9個雙環(huán)。許多化合物通過牛xue清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定，一些有ji溶劑（如yi腈、jia醇）可使蛋白變性，因此使用起來要特別注意。

卵類粘蛋白由蛋清中提取，分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。

蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應(yīng)用。

蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應(yīng)用廣的色譜柱，但并不是效果z好的色譜柱。

廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。多糖類手性柱，涂覆型三(3,5-二甲ben基氨基甲酸酯）纖維素手性色譜柱(COD柱)，適用于sheng物堿、β-受體拮抗劑、胺等化合物的拆分。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標準物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務(wù)實、的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務(wù)，準確而快捷地滿足您的需要。

Synergi選擇性液相色譜柱

Synergi Polar-RP

具有極性封尾的醚聯(lián)ben基色譜柱

pH 穩(wěn)定性： 1.5 – 7.0

粒徑： 2.5 μm、4 μm 和 10 μm

固定相： 具有極性封尾的醚聯(lián)ben基

應(yīng)用： 適用于極性和芳香族化合物的極端保留

優(yōu)勢： 利用含jia醇的流動相改善酸性和堿性分析

物的峰形以及芳香族選擇性

LuxAMP 手性液相色譜柱

對尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對映體進行快速、準確的手性分離

Lux 3μm AMP 是一款專為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開發(fā)和測試的獨特液相色譜填料。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實現(xiàn)對映體確認。

不受常見干擾物的影響

Lux 3μm AMP 的另一個顯著優(yōu)勢是，在分離ben丙胺和jia基ben丙胺對映體時不會受到下列常見的zhi療和成分的影響。此外，LuxAMP 色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對映體

廣州聯(lián)方實驗器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué)，歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。C顆粒粒徑粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時會導(dǎo)致較高柱壓降。公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。2、 美國精騏有限公司廣州一級代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。6、 提供國產(chǎn)和進口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實驗分析檢測玻璃裝置，定制各種實驗異形裝置。

與其他極性基團修飾的 C18 色譜柱相比，Synergi Fusion-RP 的 MS 柱流失可忽略不計

所有色譜柱的條件：

規(guī)格： 150 x 4.6mm

流動相： A：0.1% CH3

COOH 的水溶液

B：0.1% CH3

COOH 的jia醇溶液

梯度： 在 8 分鐘內(nèi)從 95:5 (A/B) 線性變成

5:95，保持 5 分鐘

流速： 0.5mL/min

檢測： Bruker-Daltonics Esquire 2000 IT

離子源：ESI

掃描速率：13000m/z/s

掃描范圍：50-1000

手性色譜柱知識介紹

由于形成包合物速度較慢，因此可能導(dǎo)致色譜峰峰形較差，同樣也影響了其在制備色譜中的應(yīng)用。環(huán)糊精固定相的選擇性取決分析物的分子大??；α-環(huán)糊精只能允許單ben基或萘基進入，β-環(huán)糊精允許萘基及多取代的ben基進入，γ-環(huán)糊精僅用于大分子萜類。系統(tǒng)壓力高，可能會因溶劑泵中的過濾頭供液速度跟不上而導(dǎo)致氣泡進入系統(tǒng)，停機也應(yīng)該是因為氣泡進入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過濾頭。β-環(huán)糊精手性固定相應(yīng)用范圍廣。Ibuprofen通過β-環(huán)糊精色譜柱得到分離，說明了pH值對氫鍵的影響。當(dāng)流動相的pH=7時，觀察不到拆分的跡象。pH=4時，可達到好的分離效果。通常分離氨基酸時，常采用低的pH值，以抑制酸性基團的離子化，同時也增強氨基的質(zhì)子化。磷酸三乙胺鹽、yi酸三乙胺鹽證明對β-環(huán)糊精色譜柱來說是很好的緩沖液。通常緩沖液是0.1%三乙胺溶液，用磷酸或醋酸調(diào)節(jié)到合適的pH值。高的流速會降低形成復(fù)合物的能力，低流速分離效果較好，0.5-1ml/min的流速z好。另外，增加緩沖液的濃度可以克服流速的影響，因為它可以增加環(huán)糊精洞穴和流動相的吸引力