分子生物學服務

 公司建有100平米分子實驗室，配備有PCR儀、定量PCR儀、電泳儀、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫搖床、垂直電泳儀、蛋白轉印儀、蛋白發(fā)光成像儀等設備。由于腺病毒的這些特點使其廣泛地應用于體外基因轉導、體內接種yi苗、和基因zhi療等各個領域。分子組技術人員畢業(yè)于中國農業(yè)大學、華中科技大學同濟醫(yī)學院、浙江理工大學等高校生物醫(yī)學相關，全部具有碩士研究生以上學歷，熟練掌握分子生物學相關實驗，可開展多種分子生物學檢測服務。

注意事項

1. 為了避免蛋白質變性，不要對樣品劇烈攪動和反復凍融。

2. 緩沖溶液成分盡量模擬細胞內環(huán)。。

3. 為了避免蛋白質的氧化，將 0.1～1 mmol/LDTT（二硫蘇糖醇）(或 β-巰）加入到緩沖溶液中。

4. 為了避免重金屬對目標蛋白的破壞，將 1～10 mmol/LEDTA 金屬螯合劑加入。

5. 為了避免微生物生長，使用滅菌溶液。在純化任何一種蛋白質的時候，均必須時刻對它的穩(wěn)定性注意維護，使它的活性得到保護，需要牢記如下一些通用的注意事項。

6. 盡可能置于冰上或者在冷庫內進行操作。

7. 蛋白濃度不要太稀。

8. 除非是進行聚焦層。否則 pH 需要合適，防止所使用的緩沖溶液 pH 與 pI 相同，使蛋白質的沉淀得以避免。

9. 使用蛋白酶，避免蛋白酶對目標蛋白的降解；在純化細胞中的蛋白質時，將 DNA 酶加入來使得 DNA 降解，避免 DNA 對蛋白的污染。

3.引物的OD數(shù)如何定量？

答：引物合成引物OD數(shù)是這樣測定的：用紫外分光光度計，波長260nm，石英比色杯，光程為1厘米，測定溶液的光密度。目前定量蛋白質組學技術主要分為標記(label)策略和非標記的(labelfree)定量策略，其中標記策略又分為體內標記(如SILAC、15N標記)，以及體外標記(如iTRAQ、TMT標記)。測定時溶液的光密度好稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，用1ml水稀釋測OD值。需要根據稀釋倍數(shù)換算出母液的OD值。

4.需要什么級別的引物？

答：引物常用的純化方式脫鹽、BioRP / OPC純化、PAGE純化、HPLC純化。根據實驗需要，確定訂購引物的純度級別。