支架三維（3D）細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品綜合介紹

在細(xì)胞和組織培養(yǎng)領(lǐng)域，從上世紀(jì) 70 年代起二維（2D）培養(yǎng)科學(xué)家已經(jīng)看到其局限性，并且更多地關(guān)注三維（3D）培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)，目前越來(lái)越多的研究從細(xì)胞培養(yǎng)的平面環(huán)境中轉(zhuǎn)變到三維培養(yǎng)。

當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究大多還是在二維平面培養(yǎng)進(jìn)行，這種平面培養(yǎng)、生長(zhǎng)方式與機(jī)體內(nèi)立體環(huán)境差別很大，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、分化、細(xì)胞與基質(zhì)間的相互作用以及細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用與體內(nèi)生理?xiàng)l件下細(xì)胞的行為存在明顯差異。2D 和 3D 環(huán)境下培養(yǎng)的細(xì)胞相比較，諸多生理指標(biāo)都顯著不同，例如原代小鼠乳l腺管腔上皮細(xì)胞（mammaryluminal epithelialcells, MEC）在 3D 基底膜基質(zhì)中增殖的時(shí)間明顯長(zhǎng)于 2D 培養(yǎng)環(huán)境；3D培養(yǎng)可以設(shè)計(jì)模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，讓細(xì)胞在生理行為上與機(jī)體實(shí)際的生理環(huán)境更接近。更有甚者，有時(shí)藥l物作用于 2D 培養(yǎng)的細(xì)胞呈現(xiàn)的效應(yīng)與 3D 細(xì)胞相反。

life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記

使用小分子物質(zhì)，例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料，活性和毒性檢測(cè)試劑，增值檢測(cè)試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法，除了在孵育時(shí)間上適度延長(zhǎng)以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外，與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白，則可直接用于觀(guān)測(cè)，因凝膠完全透明不影響觀(guān)測(cè)結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開(kāi)展，因水凝膠的孔徑原因，不適合直接抗l體標(biāo)記，需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來(lái)，如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過(guò)程中細(xì)胞生理活動(dòng)波動(dòng)，則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作?？傮w上說(shuō)，材料科學(xué)與生物學(xué)的結(jié)合使當(dāng)前3D培養(yǎng)方式越來(lái)越多樣化，用戶(hù)的選擇空間很大，可在比較中找到很適合自己的方法。

如果按支持材料形成的方式分，基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類(lèi)，一種是將細(xì)胞分散在液體水凝膠中，然后通過(guò)交聯(lián)實(shí)現(xiàn) 3D 培養(yǎng)，這類(lèi)產(chǎn)品代表生產(chǎn)商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等；配有紫外殺菌燈可定期對(duì)箱體內(nèi)部進(jìn)行消毒，可有效殺滅箱體內(nèi)循環(huán)空氣和增濕盤(pán)水蒸氣的浮菌，從而有效防止細(xì)胞培養(yǎng)期間的污染。另外一種是將細(xì)胞「播種“在 3D 基質(zhì)上，這類(lèi)方法的代表廠(chǎng)商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。第l一種方式中的 Cellendes 產(chǎn)品上面已經(jīng)做了簡(jiǎn)要介紹

細(xì)胞「播種”在 3D 基質(zhì)方法的代表產(chǎn)品 3D Biotek 給予簡(jiǎn)要介紹：

3D Biotek 得益于其精妙的 3D 微細(xì)加工技術(shù)和先進(jìn)的生物制造工藝，產(chǎn)品在干l細(xì)胞/組織工程、藥l物研發(fā)和細(xì)胞生物應(yīng)用等涉及 3D 培養(yǎng)的領(lǐng)域處于引l領(lǐng)地位。

其中 PS 材質(zhì)三維培養(yǎng)支架和 PCL 材質(zhì)三維培養(yǎng)支架是 3D Biotek 的熱銷(xiāo)產(chǎn)品

1）PS 材質(zhì)三維培養(yǎng)支架

PS,即聚苯l乙烯 （Poly Styrene），將 PS 材料制作成標(biāo)準(zhǔn)孔徑的三維支架，然后再將 PS 三維支架放入培養(yǎng)板（6/12/24/48/96 孔板）中，按常規(guī)二維培養(yǎng)方法，就可以進(jìn)行三維細(xì)胞培養(yǎng)了。

2）PCL 材質(zhì)三維培養(yǎng)支架

PCL,即聚己內(nèi)酯 （Polycaprolactone），是一種可生物降解的生物材料，將 PCL 材料制作成標(biāo)準(zhǔn)孔徑的三維支架，然后再將 PCL 三維支架放入培養(yǎng)板（6/12/24/48/96 孔板）中，按常規(guī)二維培養(yǎng)方法，就可以進(jìn)行三維細(xì)胞培養(yǎng)了。培養(yǎng)室適應(yīng)3種不同的尺寸，適用于24孔、12孔和6孔的三維細(xì)胞培養(yǎng)支架。