低溫生物通用工藝包

生物的產(chǎn)品在不同規(guī)模的小試和中試系統(tǒng)上進(jìn)行過工藝開發(fā)與連續(xù)生產(chǎn)，已開發(fā)出在多種應(yīng)用場(chǎng)景下利用吉態(tài)來生物微生物進(jìn)行生產(chǎn)的通用工藝包。使用過的原料包括：合成氨弛放氣、焦?fàn)t煤氣、生物質(zhì)氣化氣、鋼瓶氣和工業(yè)等。產(chǎn)出的產(chǎn)物包括：飼料蛋白原料（魚粉替代物）、生物油脂（脂肪酸）、生物柴油（脂肪酸甲酯）等大宗原料或產(chǎn)物，以及蛋白酶、DHA等高附加值產(chǎn)物。中試實(shí)現(xiàn)連續(xù)運(yùn)行、穩(wěn)定生產(chǎn)。該通用工藝包采用模塊化設(shè)計(jì)，其中模塊A為吉態(tài)來生物的產(chǎn)品，B/C/D為對(duì)應(yīng)的發(fā)酵模塊、原料預(yù)處理模塊以及產(chǎn)物后處理模塊。工程企業(yè)可直接使用該工藝包進(jìn)一步優(yōu)化，或在此基礎(chǔ)上為業(yè)主提供工程項(xiàng)目的定制解決方案

                                                    低溫生物為什么可以在零下保藏？

低溫生物都是需要保護(hù)劑的，動(dòng)物細(xì)胞也可以。細(xì)菌結(jié)構(gòu)問題使得它比較容易保存，只用加10%左右的甘油就可以在-20攝氏度保存。動(dòng)物細(xì)胞需要加DMSO等，并且需要放到-80或者液氮才行冷凍保藏是指將于-20℃以下的溫度保藏，通過冷凍，使微生物代謝活動(dòng)停止。就是通過低溫來抑制微生物的生命活動(dòng)，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài)，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素。

                                                         喚醒盛水的低溫生物

目前，保藏中心保存有各類微生物資源5700種、50000余株，用于程序的生物材料有1萬余株。那么，數(shù)目龐大的微生物資源，從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么？

“首先進(jìn)行存活度和純度檢測(cè)，然后用基因測(cè)定來核實(shí)的正確性，繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結(jié)法保存。”保藏時(shí)一般兩種方法會(huì)互為備份，使用液氮法保存6份，真空法則要備份12個(gè)。

“通過冷凍技術(shù)處理后，細(xì)菌就會(huì)處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用，則需通過相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化，才能恢復(fù)活性?！币愿袷鲜塞}堿為例說，復(fù)活所需的營(yíng)養(yǎng)為：20%的氯化鈉，酪蛋白、氨基酸、pH值為9等，在適宜的溫度和培養(yǎng)基中，這些沉睡的細(xì)菌便會(huì)被重新喚醒。

低溫生物的沙土寶藏法

(1)選擇培養(yǎng)成熟的(一般指孢子層生長(zhǎng)豐滿的，營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞用此法效果不好)優(yōu)良，以無菌水洗下，制成孢子懸液。

(2)于每支沙土管中加入約0.5ml(一般以剛剛使沙土潤(rùn)濕為宜)孢子懸液，以接種針拌勻。

(3)放入真空干燥器內(nèi)，用真空泵抽干水分，抽干時(shí)間越短越好，務(wù)使在12小時(shí)內(nèi)抽干。

(4)每10支抽取一支，用接種環(huán)取出少數(shù)沙粒，接種于斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況和有無雜菌生長(zhǎng)，如出現(xiàn)雜菌或菌落數(shù)很少或根本不長(zhǎng)，則說明制作的沙土管有問題，尚須進(jìn)一步抽樣檢查。

(5)若經(jīng)檢查沒有問題，用火焰熔封管口，放冰箱或室內(nèi)干燥處保存。每半年檢查一次活力和雜菌情況。

(6)需要使用，復(fù)活培養(yǎng)時(shí)，取沙土少許移入液體培養(yǎng)基內(nèi)，置溫箱中培養(yǎng)。

此法多用于能產(chǎn)生孢子的微生物如霉菌、，因此在工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣，效果亦好，可保存2年左右，但應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞效果不佳。