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發(fā)布時(shí)間:2021-08-04 04:19  
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外泌體是細(xì)胞外囊泡的一種,其膜來源與粒徑范圍與細(xì)胞外囊泡相似,電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。細(xì)胞和外泌體共孵育培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞可通過胞吞過程吞噬外泌體,外泌體包裹的蛋白質(zhì)、核酸等分子會(huì)釋放出來,從而影響細(xì)胞的功能變化。實(shí)際操作中,通過常規(guī)的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態(tài)、粒徑、表面分子標(biāo)記物等多方面的鑒定。具體方法包括:透射電鏡(形態(tài)鑒定)、NTA檢測(粒徑及濃度鑒定)、WB(分子標(biāo)志物)。NTA檢測作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一,可同時(shí)反映出檢測樣品的濃度及粒徑。質(zhì)量較好,純度較高的外泌體樣品,粒徑分布在30-150nm,原液濃度在10^9左右。為了保證檢測質(zhì)量,對每一個(gè)樣品,都會(huì)進(jìn)行3次技術(shù)重復(fù)。檢測周期為5個(gè)工作日。武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士創(chuàng)辦。公司長期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)。這種問題通常有三種可能性,其一:使用的細(xì)胞上清或者血qing量太低,從而造成了這樣的結(jié)果?,F(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢,面向全國提供的生物技術(shù)服務(wù)。
提取出來的外泌體能否應(yīng)用于細(xì)胞共培養(yǎng)。
答:我們提取出來的外泌體通過粒徑檢測能判斷其純度(粒徑大小均在外泌體的大小范圍),電鏡檢測能判斷其形態(tài)確為外泌體。如果樣品中的外泌體有活性的話是可以進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)的。
武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢及產(chǎn)品開發(fā)的生物技術(shù)服務(wù)企業(yè)。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士創(chuàng)辦。部分品牌離心機(jī)的角轉(zhuǎn)管壁粘附性很低,超離結(jié)束沒多久沉淀就會(huì)滑落下去,所以請?jiān)陔x心結(jié)束時(shí)趕緊去收樣。公司長期致力于建立并完善多項(xiàng)基礎(chǔ)生物技術(shù)服務(wù)平臺(tái)。現(xiàn)憑借自身技術(shù)特色,依托光谷生物城技術(shù)產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢,面向全國提供生物技術(shù)服務(wù)。
外泌體電鏡分析
雙層囊膜結(jié)構(gòu)(茶托狀)是外泌體重要標(biāo)志之一,但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可達(dá)0.1 - 0.2 nm,可將被觀察物體放大至數(shù)百萬倍,是外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測的經(jīng)典方法。因此外泌體檢測首先需要對其進(jìn)行分離純化,然后通過形態(tài)學(xué)檢測或特異性表面蛋白標(biāo)志物鑒定后才能對下游的蛋白和核酸分子進(jìn)行分析。研載生物有多種外泌體樣品和上千張外泌體電鏡圖片的拍攝經(jīng)驗(yàn),在制樣、拍攝、選片等方面具備豐富經(jīng)驗(yàn)。