熒光分光光度計種類

熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點，可以廣泛應用于生命科學、醫(yī)學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。熒光分光光度計的發(fā)展經歷了手控式熒光分光光度計，自動記錄式熒光分光光度計，計算機控制式熒光分光光度計三個階段；熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計，配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。

熒光光譜儀

根據波茲曼 （Boltzmann）分布，分子在室溫時基本上處于 電子能級的基態(tài)。當吸收了紫外-可見光后，基態(tài)分子中的電子只能躍遷到激發(fā)單重態(tài)的各個不同振動-轉動能級，根據自旋禁阻選律, 不能直接躍遷到激發(fā)三重態(tài)的各個振動-轉動能級。處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的，通常以輻射躍遷和無輻射躍遷等方式釋放多余的能 量而返回至基態(tài)，發(fā)射熒光是其中的一條途徑。振動弛豫（vibrational relexation）是處于激發(fā)態(tài)各振動能級的分子通過與溶劑分子的碰攛而將部分振動能量傳遞給溶劑分子，其電子則返回到同一電子激發(fā)態(tài)的低振動能級的過程。由于能量不是以光輻射的形式放出，故振動弛豫屬于無輻射躍遷。振動弛豫只能在同一電子能級內進行，發(fā)生振動弛豫的時間約為 秒數量級。內部能量轉換（ internal conversion）簡稱內轉換，是當兩個電子激發(fā)態(tài)之間的能量相差較小以致其振動能級有重疊時，受激分子常由高電子能級以無輻射方式轉移至低電子能級的過程。

淺析熒光光譜

無論分子初處于哪一個激發(fā)單重態(tài)，通過內轉換及振動弛豫，均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動能級，然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動能級上,這時發(fā)射的光稱為熒光。由于振動弛豫和內轉換損失了部分能童，故熒光的波長總比激發(fā)光波長要長。發(fā)射熒光的過程為 秒。由于電子返回基態(tài)時可以停留在基態(tài)的任一振動能級上，因此得到的熒光譜線有時呈現幾個非常靠近的峰。通過進一步振動弛豫，這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動能級。

熒光光譜

熒光分析法的特點是靈敏度高，對某些物質的微量分析可以檢測到 克數量級，如污水中的銀含量用熒光分析法可以檢測到 克，可以檢測到 克。對一些亦可檢測到 克。熒光分析的靈敏度比分光光度法的靈敏度高2~3個數量級，這是由于熒光分析的熒光和入射光之間成直角，而不在一條直線上，所以是在黑背景下檢測熒光。而分光光度法的與入射光在一條直線上，所以它是在亮背景下檢測。因此熒光分析法比分光光譜法靈敏度高。分光光譜法的靈敏度一般只能檢測到 克，兩者相差三個數量級。當然熒光分析法比起帶電子顯微鏡的電子探針法靈敏度又低一些，然而電子探針儀器價格昂貴，使用不方便。