低溫生物菌種知多少？

實驗室菌種的傳代保藏過程

1. 按菌種說明書要求復(fù)溶菌粉，轉(zhuǎn)種于適當?shù)脑鼍囵B(yǎng)基內(nèi)（G1），復(fù)壯后轉(zhuǎn)接至平板上，并于適當溫度下培養(yǎng)適當時間，分離出單個純種菌落，此為第2代（G2）。

2. 菌種鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌種作為工作用菌種。此時，保藏菌種為第2代，但工作用菌種則為第三代。

3. 將第2代菌種管冷凍保存，將工作用菌種于適當溫度下培養(yǎng)適當時間后可用于試驗。

4. 取一支冷凍保存的G2代菌種轉(zhuǎn)種于平板和斜面培養(yǎng)基上，平板上的菌種制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養(yǎng)基經(jīng)適當溫度下培養(yǎng)適當時間后用作工作用菌種（W3）。

5. 將第三代菌種（G3）冷凍或低溫保存，將生長、轉(zhuǎn)種后的G2菌種經(jīng)滅菌處理后丟棄。

6. 當工作用菌種代數(shù)小于5時，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種，如W3可直接轉(zhuǎn)接為W4。

7. 按上述程序操作，直至G4轉(zhuǎn)為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復(fù)上述操作程序、保藏和使用菌種。

以上方法中，菌種被分為兩類。傳代用菌種和工作用菌種，傳代用菌種用于甘油冷凍管法保藏，工作用菌種用斜面低溫保藏法保藏。

實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應(yīng)用其它方法。

耐低溫生物菌種-選擇開碧源

水醫(yī)生--開碧源從17年開始就和清華大學及北京云陽張環(huán)保設(shè)備廠聯(lián)合將耐低溫菌種從實驗室的小試走向規(guī)模化的中試，在北京順義馬坡工業(yè)區(qū)污水廠進行耐低溫菌種的耐低溫中試驗證，倆套一模一樣AO氧化接觸工藝的日處理10噸的污水中試設(shè)備，從5月份開始同時培養(yǎng)微生物，一套投加耐低溫生物菌種，一套沒有投加耐低溫菌種，馴化培養(yǎng)運行30天后，開始定期取樣檢測，經(jīng)對比驗證，添加耐低溫菌種的中試設(shè)備，從掛膜速度及COD氨氮磷及總氮的去除率，都比沒有添加耐低溫菌種的中試設(shè)備高10--30%，中試一直連續(xù)運行到冬天，沒有添加耐低溫菌種的中試設(shè)備做保溫和加蓋處理，添加耐低溫菌種的中試設(shè)備沒有做保溫和加蓋處理。，沒有做保溫的中試設(shè)備，水溫達到3.5度（保持在5度左右），水面已經(jīng)結(jié)冰，做保溫加蓋的中試設(shè)備，水面沒有結(jié)冰，水溫保持在10度左右，進水量和進水水質(zhì)指標都一樣，持續(xù)低溫運行，并連續(xù)取樣化驗，做保溫的中試設(shè)備，進水和出水幾乎一致，證明：普通菌種在水溫10度的時候，已經(jīng)停止工作，幾乎沒有任何降解能力。

                                                            低溫生物菌種的脫水存法

③ 石蠟油封存法，在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。