偏光顯微鏡物鏡的鑒別率

物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個(gè)物點(diǎn)清晰分辨的能力，以兩個(gè)物點(diǎn)能清晰分辨的距離d的倒數(shù)表示。d愈小，表示物鏡的鑒別率愈高。

要明白鑒別率可以有一定的限度，這就要用光通過(guò)透鏡后產(chǎn)生衍射現(xiàn)象來(lái)解釋。物體通過(guò)光學(xué)儀器成象時(shí)，每一物點(diǎn)對(duì)應(yīng)有一象點(diǎn)，但由于光的衍射，物點(diǎn)的象不再是一個(gè)幾何點(diǎn)，而是有一定大小的衍射亮斑?？拷膬蓚€(gè)物點(diǎn)所成的象一兩個(gè)亮斑如果互相重疊，則導(dǎo)致這兩個(gè)物點(diǎn)分辨不清，從而限制了光學(xué)系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)一分辨率。顯然，象面上衍射圖象中央亮斑半徑愈大，系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)愈小。

瑞利（Rayleigh）提出一個(gè)推測(cè)（又稱瑞利準(zhǔn)則）：認(rèn)為當(dāng)A1′衍射花樣的值正好落在A2′衍射花樣的極大值時(shí)，A1、A2是可以分辨的，將此時(shí)定出的兩物點(diǎn)距離A1、A2作為光學(xué)統(tǒng)的分辨極限。θ0稱為極限分辨角。不言而喻，當(dāng)θ＞θ0時(shí)是完全可分辨的，θ＜θ0時(shí)是不可分辨的。

由圓孔衍射理論得到：θ0=1.22λ / D

式中λ──入射光波長(zhǎng)；

D──入射光的允許孔徑（透鏡直徑）。

因?yàn)棣?很小，所以由圖2-4得：

d′≈θ0=1.22λS / D

物鏡在設(shè)計(jì)時(shí)，總是使它滿足阿貝正弦條件的，即

ndsinu=n′d′sinu′

式中n和n′為物、象所在空間的折射率，成象總是在空氣介質(zhì)中，故n′=1；u各u′分別為光線在物、象空間共軛點(diǎn)上的孔徑角；d和d′分別為物點(diǎn)、象點(diǎn)中心斑的間距。

考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光，有傾斜光線，對(duì)上式系數(shù)作適當(dāng)?shù)男拚?，所以式中nsinu就是物鏡的數(shù)值孔徑，因此，上式或者寫：d=0.5λ/N.A

因此表明：物鏡的數(shù)值孔徑愈大，入射光的波長(zhǎng)愈短，則物鏡的分辨能力愈高。在可見(jiàn)光中，觀察時(shí)常用黃綠光（λ ≈4400A），則可使分辨能力提高25%左右

偏光顯微鏡物鏡中心調(diào)節(jié)方法

（1）觀察旋轉(zhuǎn)工作臺(tái)上的切片，在切片中找一小黑點(diǎn)，使位于目鏡十字線中心。

（2）轉(zhuǎn)動(dòng)工作臺(tái)，若物鏡光軸中心O與工作臺(tái)中心不一致，黑點(diǎn)即離開(kāi)十字線中心繞一個(gè)圓轉(zhuǎn)動(dòng)。圓的中心S即為工作臺(tái)的中心。

（3）將小黑點(diǎn)轉(zhuǎn)至距十字線中心遠(yuǎn)的1點(diǎn)處，旋轉(zhuǎn)物鏡座上兩個(gè)調(diào)節(jié)螺絲使小黑點(diǎn)自1處移至O-1直線的中點(diǎn)（即1點(diǎn)距十字線中心距離的一半）。

（4）如此循環(huán)進(jìn)行上述三步驟可使物鏡光軸與旋轉(zhuǎn)工作臺(tái)中心重合。

在高倍鏡下看到標(biāo)本后，把需要進(jìn)一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺(tái)約1.5厘米。將物鏡轉(zhuǎn)離光軸，在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油，把光闌升至。換上油鏡，小心調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺(tái)，從側(cè)面觀察油鏡下端與標(biāo)本之間的距離，當(dāng)油鏡的下端開(kāi)始觸及油滴時(shí)即可停止。從目鏡觀察，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直至看清標(biāo)本物像。

觀察完畢，上升鏡筒或下降載物臺(tái)，將油鏡轉(zhuǎn)離光軸，用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油，再用浸濕的擦鏡紙擦拭兩三次，后用干凈的擦鏡紙?jiān)俨潦脙扇巍?/p>

三觀察后的處理工作

清潔：顯微鏡上的污物（殘物或灰塵），用擦鏡紙擦干凈，若擦不干凈可蘸少許進(jìn)行擦拭。

顯微鏡各部分的放置：擦完后，把物鏡轉(zhuǎn)離光軸，把反光鏡轉(zhuǎn)到與載物臺(tái)垂直的方向，以減少灰塵粘落上面，而后罩上鏡套，小心的放回鏡箱內(nèi)，保存?zhèn)溆谩?/p>

⒈光學(xué)部分的擦拭

順序：吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸輕擦。

鏡頭表面發(fā)霉和發(fā)霧可用擦鏡紙蘸少量酒精混合液（3：7）輕擦。內(nèi)表面發(fā)霉和發(fā)霧，一般無(wú)法清除，所以嚴(yán)防發(fā)生。

⒉機(jī)械部分的擦拭

用干凈的軟布擦拭，或用擦鏡紙蘸輕擦，不得用酒精和，因?yàn)檫@些試劑會(huì)侵蝕油漆，容易把油漆擦掉。

防潮、防塵、防腐蝕、放熱

正交偏光顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)

正交偏光顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)：

1）搬動(dòng)、放置及使用顯微鏡時(shí)，動(dòng)作要輕，防止震動(dòng)。從鏡箱里取出顯微鏡時(shí)，必須手握鏡臂，切勿提住微動(dòng)螺絲以上的任何部位。

2）鏡頭必須保持清潔，若鏡頭上有灰塵，則需用擦鏡頭的軟紙擦，切不可用手指或粗紙擦，以防損壞鏡頭。

3）顯微鏡的任何附件，應(yīng)嚴(yán)防墜地或跌落。附件用畢放回原處，禁止隨便放在桌上或夾在書中帶走。

4）不得隨便拆卸顯微鏡。

5）薄片置于載物臺(tái)上，需以彈簧夾壓緊，蓋玻片必須朝上，不得使薄片反置于載物臺(tái)上。

6）下降鏡筒時(shí)，切勿使物鏡與薄片相撞而損壞鏡頭和薄片。

7）當(dāng)校正螺絲失效時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力扭動(dòng)，應(yīng)找人員維修。

8）用完后，應(yīng)將上偏光鏡、勃氏鏡推入鏡筒內(nèi)，以免落入灰塵。在鏡筒上如有罩子則需罩上，若無(wú)，則需置一目鏡，以免灰塵掉入鏡筒內(nèi)。