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實驗室微生物檢測常用指南「在線咨詢」

發(fā)布時間:2021-07-20 05:20  

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{微生物檢測}微生物接種





4、澆混接種

該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長出單個的微生物菌落。

5、涂布接種

與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落。

6、液體接種

從固體培養(yǎng)基中將菌洗下,倒入液體培養(yǎng)基中,或者從液體培養(yǎng)物中,用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中,或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中,都可稱為液體接種。

7、注射接種

該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi),如人或其它動物中,常見的yimiao預(yù)防接種,就是用注射接種,接入人體,來預(yù)防某些疾病。

8、huoti接種

huoti接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內(nèi)才能生長繁殖。所用的huoti可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴等;也可以是發(fā)育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養(yǎng)。

注:有所接種必須無菌操作

培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后,用經(jīng)過滅菌的工具(如接種針和吸管等)在無菌條件下接種含菌材料(如樣品、菌苔或菌懸液等)于培養(yǎng)基上,這個過程叫做無菌接種操作。在實驗室檢驗中的各種接種必須是無菌操作。

(1)接種滅菌 (2)開啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好棉塞。



抑菌效力

抑菌劑效力測定用培養(yǎng)基應(yīng)進行培養(yǎng)基的適用性檢查,包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按配制的培養(yǎng)基均應(yīng)檢查。

7.2試驗所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代(從保藏中心獲得的冷凍干燥為第0代),并采用適宜的保藏技術(shù)進行保存,以保證試驗菌株的生物學(xué)特性。

銅綠假單胞菌     (Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕

大腸埃希菌        (Escherichia coli) 〔CMCC(B) 44 102〕

金黃色菌 (Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕

白色菌         (Candida albicans) 〔CMCC(F) 98 001〕

黑曲霉                (Aspergillus  niger) 〔CMCC(F)

98 003〕









微生物計數(shù)





3.濾膜法

濾膜法是當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器。然后將濾膜干燥、染色,并經(jīng)處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積上)的細(xì)菌數(shù)。

此法也可以通過培養(yǎng)觀察形成的菌落數(shù)來推算樣品中的菌數(shù)。例如測定飲用水中大腸gan菌的數(shù)目:將已知體積的水過濾后,將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上大腸gan菌的菌落呈現(xiàn)黑色,可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目,計算出水樣中大腸gan菌的數(shù)目。食源病原微生物可通過接觸物表面、水、土壤、空氣、排泄物、食物等媒介傳播,從而污染“從農(nóng)田到餐桌”的食物鏈任何環(huán)節(jié)。

此法也是統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。

4.比濁法

原理是在一定范圍內(nèi),菌是懸液中細(xì)胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大。因此可借助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量。實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi),否則不準(zhǔn)確。

5.顯微鏡直接計數(shù)法

在課本生物選修1生物技術(shù)實踐P22中“除了上述活菌計數(shù)法外,顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法?!边@里說的顯微鏡直接計數(shù),我認(rèn)為應(yīng)該是在稀釋涂布的基礎(chǔ)上不培養(yǎng)成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數(shù)。再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況。8、huoti接種huoti接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內(nèi)才能生長繁殖。

另外,微生物計數(shù)法發(fā)展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統(tǒng)計微生物的數(shù)目。