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發(fā)布時(shí)間:2020-10-14 03:47  
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大腸菌群檢驗(yàn)方法
國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法,即:乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、分離培養(yǎng)和證實(shí)試驗(yàn)?! ∪樘前l(fā)酵試驗(yàn):樣品稀釋后,選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h,觀察是否產(chǎn)氣。
分離培養(yǎng):將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24h,觀察菌落形態(tài)。
證實(shí)試驗(yàn):挑取平板上的ke疑菌落,進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。
報(bào)告:根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽(yáng)性的管數(shù),查MPN表,報(bào)告每100ml(g)大腸菌群的MPN值。
在現(xiàn)在已知的大腸桿菌檢測(cè)方法中,酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測(cè)的先進(jìn)方法。這也就直觀的影響到了很多檢測(cè)人員對(duì)于酶底物法檢測(cè)水中大腸桿菌的方法的掌握,因?yàn)槿绻褂脗鹘y(tǒng)的多管發(fā)酵法和濾膜法的話,整體的操作過(guò)程比較繁瑣,并且是試驗(yàn)環(huán)境要求比較高。檢測(cè)時(shí)間比較長(zhǎng),所以酶底物法是現(xiàn)在追捧的檢測(cè)的水中大腸桿菌的方法。
那其實(shí)從整個(gè)客觀角度來(lái)說(shuō),相對(duì)于多管發(fā)酵和濾膜法,酶底物法檢測(cè)步驟大大減少,而且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高,檢測(cè)時(shí)間可減少到24小時(shí),在日常水樣監(jiān)測(cè)及應(yīng)急監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用前景,可及時(shí)檢測(cè),預(yù)防,較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。酶底物法有商品化試劑供應(yīng),實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便,無(wú)需確認(rèn)試驗(yàn),可同時(shí)檢測(cè)水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌。
大腸桿菌是寄生在任何許多動(dòng)物體內(nèi),主要是腸道內(nèi)的細(xì)菌,并且可以致病,因此有必要做好大腸桿菌檢測(cè)。大腸桿菌對(duì)人和動(dòng)物有病原性,尤其對(duì)嬰兒和幼畜(禽),常引起嚴(yán)重腹瀉和bai血癥,它是一種普通的原核生物,根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為6類(lèi):腸致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸chu血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。
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大腸菌群分布較廣,在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明,大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類(lèi)經(jīng)?;顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方,人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。