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洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話 思特進(jìn)

發(fā)布時(shí)間:2021-08-07 11:08  

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。正胡蘿卜含有豐富的胡蘿卜素、花青素、番茄紅素、核黃素、蛋白質(zhì)、碳水化合物及人體所需的多種微量元素,可增強(qiáng)視力、防治心臟病、清除氧自由基、血壓、等。





泛素-蛋白酶體通路在植物防衛(wèi)反應(yīng)(包括反應(yīng))中發(fā)揮重要作用,泛素連接酶(ubiquitin ligase, E3)則是參與這一過(guò)程的重要組分。WRKY轉(zhuǎn)錄因子和病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-relatedproteins,PRs)在植物抗病信號(hào)調(diào)控途徑中起著重要作用。本研究旨在通過(guò)和分析與馬鈴薯晚疫病抗性相關(guān)的泛素連接酶家族中的成員,初步揭示這類基因在馬鈴薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的調(diào)控作用,或它們?cè)隈R鈴薯防御晚疫病菌侵染的信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中的作用,為進(jìn)一步深入開展抗性機(jī)理研究奠定基礎(chǔ)。 本實(shí)驗(yàn)室從晚疫病誘導(dǎo)的馬鈴薯水平抗性材料構(gòu)建的cDNA文庫(kù)中篩選出兩個(gè)與Avr9/Cf-9 rapidly elicited protein (ACRE,具有泛素連接酶E3活性)基因有很高同源性的EST片段(10-A12和08-E12)。本研究中,我們了這兩個(gè)EST片段所代表的基因,StRFP和StPUB,并研究了其生物學(xué)功能。 StRFP基因的全長(zhǎng)cDNA為1354 bp,包含一個(gè)789 bp的開放閱讀框(ORF),編碼262個(gè)氨基酸,含有高度保守的RING-H2型RING指結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和GLD結(jié)構(gòu)域,是一個(gè)新的馬鈴薯ATL (Arabidopsis toxico para levadura)蛋白。StRFP基因位于馬鈴薯第3條染色體上,不含內(nèi)含子。馬鈴薯基因組中可能有1-2個(gè)StRFP基因拷貝或與之同源性高的基因。利用洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行的StRFP-GFP融合蛋白亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,StRFP在細(xì)胞膜上或膜外表達(dá)。


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存植物基因工程育種中,與導(dǎo)入一個(gè)功能基因相比,導(dǎo)入一個(gè)關(guān)鍵的調(diào)控基因的改良效果更好。而基因的表達(dá)調(diào)控是在多級(jí)水平上參加的復(fù)雜事件,其中轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的的調(diào)節(jié)環(huán)節(jié),翻譯以及翻譯后加工是基因表達(dá)的基本控制點(diǎn)。囚此本研究以剛毛檉柳(Tamarix hispida)的轉(zhuǎn)錄因子ThDREB和翻譯起始因子TheIFIA兩個(gè)基因?yàn)檠芯繉?duì)象,對(duì)基因的表達(dá)和功能進(jìn)行了初步研究,以期為抗逆基因工程育種提供理論依據(jù)和基因材料。馬鈴薯基因組中可能有1-2個(gè)StRFP基因拷貝或與之同源性高的基因。


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以向日葵無(wú)菌苗的子葉節(jié)為外植體,通過(guò)農(nóng)介導(dǎo)法,對(duì)其遺傳轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行了研究,建立了向 日葵子葉節(jié)農(nóng)介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系.結(jié)果表明:在農(nóng)浸染前(浸染濃度為OD600=0.6)進(jìn)行2 d的預(yù)培養(yǎng)、浸染8 min的外植體在MS+1.2 mg/L 6-BA+0.03 mg/L IAA的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)化效率較高.PCR檢測(cè)初步證明,LycB基因已整合到向日葵再生植株中.


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以NHD_3、NC、NF三種馬鈴薯品種的莖段為外植體,篩選出誘導(dǎo)形成愈傷組織的培養(yǎng)基,探討不同轉(zhuǎn)化條件對(duì)馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響。結(jié)果表明:在1.0 mg·L~(-1) 6-BA濃度不變情況下,愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中NHD_3、NC、NF莖段分別在NAA濃度為0.2、0.3、0.4 mg·L~(-1)時(shí)愈傷形成及生長(zhǎng);本研究旨在通過(guò)和分析與馬鈴薯晚疫病抗性相關(guān)的泛素連接酶家族中的成員,初步揭示這類基因在馬鈴薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的調(diào)控作用,或它們?cè)隈R鈴薯防御晚疫病菌侵染的信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中的作用,為進(jìn)一步深入開展抗性機(jī)理研究奠定基礎(chǔ)。在莖段預(yù)培養(yǎng)2 d,共培養(yǎng)2d,農(nóng)菌液在OD_(600)=0.6的條件下轉(zhuǎn)化所得抗性愈傷誘導(dǎo)率。