PCR實驗室基本知識介紹

PCR實驗室基本知識

1、四個過程

(在這里面的醫(yī)學(xué)檢驗、病理、分子生物等專業(yè)的人都基本了解，SICOALB就不多重復(fù)了，簡單說一下)PCR 實驗室又叫基因擴增實驗室，是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡稱，用于放大特定的 DNA 片 段，可看作生物體外的特殊 DNA 。完成一組 PCR 實驗，通常需經(jīng)過試劑準(zhǔn)備、樣品制備、核酸擴增和產(chǎn)物分析 4 個過程。

2、單向

為避免交叉污染，進入各個區(qū)域的工作流程須嚴(yán)格遵循單一方向進行，按照清潔-半污染-污染的順序排列，各區(qū)內(nèi)的試劑和耗材不能再進入任何“上游”區(qū)域。也就是(試劑準(zhǔn)備區(qū)-樣品制備區(qū)-核酸擴增區(qū)-產(chǎn)物分析區(qū))。

PCR實驗（experiment)室完備的實驗室配套設(shè)施

完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗網(wǎng)站內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器（appliance），如超凈工作臺、離心機、加樣器等。實驗室建設(shè)近些年實驗室建設(shè)主要是靠國家的撥款，因為科技發(fā)展緩慢，國家才提出了實驗室建設(shè)問題，因而設(shè)立了國家重點實驗室等，而實驗室建設(shè)也主要是指國家對這些實驗室的科研經(jīng)費支持。實驗室集中供氣通過供氣控制系統(tǒng)可以充分使用氣體，減少殘余的氣體，更科學(xué)更穩(wěn)定更安全可以大大降低成本，避免安全隱患。所有氣源集中在同一地方便于管理，管路設(shè)計科學(xué)方便用氣輸出，大大降低勞動強度。

PCR實驗室可分為2個大的功能工作區(qū)域：

核酸擴增前區(qū)和核酸擴增后區(qū)。核算擴增前區(qū)包括試劑準(zhǔn)備間和樣本制備間，這個兩房間各自獨立，不能出現(xiàn)空氣互通，這兩個房間相對外界氣壓呈正壓狀態(tài)。核酸擴增后區(qū)包括擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，這個兩區(qū)域可以合并為一個房間。這個區(qū)域如果是分開兩個房間，這兩個房間也必須是各自獨立，不能出現(xiàn)空氣互通。核算擴增后區(qū)對外界氣壓呈負(fù)壓狀態(tài)。