PCR實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)介紹

PCR實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)

1、四個(gè)過(guò)程

(在這里面的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、病理、分子生物等專(zhuān)業(yè)的人都基本了解，SICOALB就不多重復(fù)了，簡(jiǎn)單說(shuō)一下)PCR 實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱(chēng)，用于放大特定的 DNA 片 段，可看作生物體外的特殊 DNA 。完成一組 PCR 實(shí)驗(yàn)，通常需經(jīng)過(guò)試劑準(zhǔn)備、樣品制備、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析 4 個(gè)過(guò)程。

2、單向

為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)區(qū)域的工作流程須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，按照清潔-半污染-污染的順序排列，各區(qū)內(nèi)的試劑和耗材不能再進(jìn)入任何“上游”區(qū)域。也就是(試劑準(zhǔn)備區(qū)-樣品制備區(qū)-核酸擴(kuò)增區(qū)-產(chǎn)物分析區(qū))。

PCR實(shí)驗(yàn)（experiment)室完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施

完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)網(wǎng)站內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器（appliance），如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)近些年實(shí)驗(yàn)室建設(shè)主要是靠國(guó)家的撥款，因?yàn)榭萍及l(fā)展緩慢，國(guó)家才提出了實(shí)驗(yàn)室建設(shè)問(wèn)題，因而設(shè)立了國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等，而實(shí)驗(yàn)室建設(shè)也主要是指國(guó)家對(duì)這些實(shí)驗(yàn)室的科研經(jīng)費(fèi)支持。實(shí)驗(yàn)室集中供氣通過(guò)供氣控制系統(tǒng)可以充分使用氣體，減少殘余的氣體，更科學(xué)更穩(wěn)定更安全可以大大降低成本，避免安全隱患。所有氣源集中在同一地方便于管理，管路設(shè)計(jì)科學(xué)方便用氣輸出，大大降低勞動(dòng)強(qiáng)度。

PCR實(shí)驗(yàn)室可分為2個(gè)大的功能工作區(qū)域：

核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)。核算擴(kuò)增前區(qū)包括試劑準(zhǔn)備間和樣本制備間，這個(gè)兩房間各自獨(dú)立，不能出現(xiàn)空氣互通，這兩個(gè)房間相對(duì)外界氣壓呈正壓狀態(tài)。核酸擴(kuò)增后區(qū)包括擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室，這個(gè)兩區(qū)域可以合并為一個(gè)房間。這個(gè)區(qū)域如果是分開(kāi)兩個(gè)房間，這兩個(gè)房間也必須是各自獨(dú)立，不能出現(xiàn)空氣互通。核算擴(kuò)增后區(qū)對(duì)外界氣壓呈負(fù)壓狀態(tài)。