色譜分離基本原理    

在色譜法中存在兩相，一相是固定不動(dòng)的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過(guò)固定相，我們把它叫做流動(dòng)相。     液相色譜的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離的。使用外力使含有樣品的流動(dòng)相（氣體、液體）通過(guò)一固定于柱中或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。     由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡，液相色譜使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。

液相色譜儀的使用特點(diǎn)進(jìn)行分析概要

　液相色譜儀是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)中，流動(dòng)相改為高壓輸送，色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜；同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器，可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)?！　∫合嗌V儀特點(diǎn)：　　

1、高壓：液相色譜法以液體為流動(dòng)相，液體流經(jīng)色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地通過(guò)色譜柱，必須對(duì)載液施加高壓。一般可達(dá)150～350×105Pa；　　

2、高速：流動(dòng)相在柱內(nèi)的流速較經(jīng)典色譜快得多，一般可達(dá)1～10ml/min。液相色譜法所需的分析時(shí)間較之經(jīng)典液相色譜法少得多，一般少于1h；　　

3、效率很高：近來(lái)研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高；　　

4、高靈敏度：液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測(cè)器，進(jìn)一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測(cè)器靈敏度可達(dá)10-11g。另外，用樣量小，一般幾個(gè)微升；　　

5、適應(yīng)范圍寬

什么是液相色譜?

液相色譜的定義是二十世紀(jì)早期由俄羅斯植物學(xué)家 MikhailS. 茨維特提出的。他先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來(lái)分離從植物中提取的化合物(樹(shù)葉色素)。茨維特用顆粒填滿開(kāi)口的玻璃柱。他發(fā)現(xiàn)兩種特殊的材料，粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品(混勻植物葉的溶劑提取物)倒入柱中，并讓樣品流過(guò)顆、粒床。隨后加入純?nèi)軇?。隨著樣品由于重力自上而下流過(guò)柱子，可看到不同顏色的譜帶被分開(kāi)，因?yàn)橛行┙M分比另外一些移動(dòng)得快。他將這些分開(kāi)的不同顏色的譜帶與樣品中原有的不同化合物相關(guān)聯(lián)。他還根據(jù)每一種化合物對(duì)填料的化學(xué)親和性強(qiáng)弱，提出了分析這些化合物的分離規(guī)律。與顆粒填料有較強(qiáng)親和性的化合物移動(dòng)慢，與溶劑有較強(qiáng)親和性的化合物移動(dòng)快。這個(gè)過(guò)程可這樣描述:樣品中的化合物在流動(dòng)的溶劑(流動(dòng)相)與固體顆粒(固定相)間的分布不一樣。這樣使每一種化合物以不同的速度移動(dòng)，從而產(chǎn)生了化合物之間的分離。

液相色譜法

色譜法的創(chuàng)始人是俄國(guó)的植物學(xué)家茨維特（ M.Tswett）。1906年，俄國(guó)植物學(xué)家茨維特發(fā)表了他的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：為了分離植物色素，他將含有植物色素的石油的醚提取液倒入裝有碳酸鈣粉末的玻璃管中，并用石油的醚自上而下淋洗，由于不同的色素在碳酸鈣顆粒表面的吸附力不同，隨著淋洗的進(jìn)行，不同色素向下移動(dòng)的速度不同，從而形成一圈圈不同顏色的色帶，使各色素成分得到了分離。他將這種分離方法命名為色譜法(chromatography)。