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發(fā)布時間:2021-01-04 16:34  
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液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如,紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。液相色譜儀常見故障斷定及解決方法,峰拖尾,柱超載:降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相,峰干擾:清潔樣品,調(diào)整流動相,硅羥基作用。對液相色譜儀的要求,更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙i醇過渡一下。
液相色譜儀常見故障斷定及解決方法,保留時間變化,柱溫變化:柱恒溫,必要時需配置恒溫箱,等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動相平衡柱,緩沖液容量不夠:用》25mmol/L的緩沖液,柱污染:每天沖洗柱,柱內(nèi)條件變化:穩(wěn)定進樣條件,調(diào)節(jié)流動相,出現(xiàn)肩峰或分,樣品體積過大:用流動相配樣,總的樣品體積小于峰的15%,樣品溶劑過強:采用較弱的樣品溶劑,
液相色譜儀常見故障斷定及解決方法,基線噪聲 ,氣泡(尖銳峰) 流動相脫氣:加柱后背壓,污染(隨機噪聲) :清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑,檢測器燈連續(xù)噪聲:更換燈,電干擾(偶然噪聲) :采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等),檢測器中有氣泡:流動相脫氣,加柱后背壓。在檢測器通電之前,一定要確保載氣已經(jīng)通過了檢測器,否則,熱絲可能被燒斷,致使檢測器報廢。三氟i乙i酸(TFA)氧化(肽譜) :每天新配,用抗i氧化劑,水污染(反相) :通過變化平衡時間檢查水質(zhì)量,用HPLC級的水。
色譜儀分離方法選擇的主要根據(jù)是什么,溶解度:水溶性樣品zui好用離子交換色譜儀和液液分配色譜儀剖析。微溶于水,但在酸或堿存能很好電離的化合物,可用離子交換色譜儀剖析。油溶性和非極性的樣品,可用液固吸附色譜儀剖析。點火電路輸出電壓檢查:直接測量點火電源的輸出電壓是否為額定值,便可知點火電源有否故障。液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?原因:篩板堵塞或柱失效,存在干擾峰,解決辦法:對于種情況可以反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子;對于種情況解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子。