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4.樣品預(yù)處理在樣品基體比較復(fù)雜的情況下，樣品的純化過(guò)濾更為重要，樣品處理不好，容易堵塞樣品口和色譜柱。試樣要經(jīng)過(guò)過(guò)濾。5.其他堵塞現(xiàn)象●液相系統(tǒng)中常堵的位置有溶劑吸濾頭，它在管道內(nèi)會(huì)堵塞許多氣泡，根據(jù)吸濾頭材質(zhì)選擇合適的清洗方式，必要時(shí)更換新的?！駟蜗蜷y芯此處堵住，將導(dǎo)致泵內(nèi)壓力不穩(wěn)，有氣泡，嚴(yán)重時(shí)泵出液體，清洗不能排除故障時(shí)，更換配件?！褡詣?dòng)進(jìn)樣器針座，此處堵了會(huì)造成進(jìn)樣口漏液，反沖無(wú)法解決故障時(shí)，更換針座密封，若進(jìn)樣隔墊堵塞進(jìn)樣針可用打火機(jī)加熱灼燒，試樣無(wú)法解決故障時(shí)，更換針座密封。色譜柱壓力升高，反沖不能解決，應(yīng)更換新柱子。循環(huán)池體積較小，如堵塞后無(wú)法沖出，可更換新配件。樣品瓶和蓋墊選擇不當(dāng)，可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，更嚴(yán)重的會(huì)對(duì)儀器造成損壞，如下圖中由于進(jìn)樣瓶蓋選擇不當(dāng)，導(dǎo)致進(jìn)樣針扎彎。

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樣品分析時(shí)，是否遇到過(guò)不均勻性差、數(shù)據(jù)分析有雜峰？碰到這樣的情況，很多小伙伴首先就會(huì)分析實(shí)驗(yàn)的過(guò)程、實(shí)驗(yàn)方法是否正確，但其實(shí)步應(yīng)該先看看進(jìn)樣瓶瓶蓋是否擰正。由于錯(cuò)誤的擰蓋或壓蓋(針對(duì)鉗口瓶)也會(huì)對(duì)色譜分析產(chǎn)生干擾。見到這兒，相信大家都是一臉的問(wèn)號(hào)。別不信，因?yàn)樵囼?yàn)測(cè)試結(jié)果顯示，進(jìn)樣瓶蓋擰得太緊，增加了產(chǎn)生雜峰的風(fēng)險(xiǎn)(下面是測(cè)試譜圖)。接下來(lái)就讓我們一起來(lái)看一下擰蓋/壓蓋不正確所存在的危險(xiǎn)，以及如何判斷蓋是否正確上緊/壓緊的狀態(tài)！(僅以2 mL樣品瓶、 PP蓋子和 PTFE/硅膠墊片為例，對(duì)鉗口瓶蓋墊也同樣適用。)

3、使用手動(dòng)進(jìn)樣器應(yīng)注意的問(wèn)題1)排出的毛細(xì)管出口和針口必須在相同的水平面上，以防止回流泄漏或2)在插入位置時(shí)，可將手動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣針移出，以防止倒吸或產(chǎn)生氣泡。此時(shí)還可以3)進(jìn)樣器進(jìn)樣量至少要大于2~3倍的定量環(huán)體積，或是少于定量環(huán)體積的一半。4)應(yīng)選擇液相平頭針三、自動(dòng)進(jìn)樣器1.當(dāng)針頭吸完后，插入針座，進(jìn)樣閥在同一時(shí)間切換位置，將樣品導(dǎo)入到系統(tǒng)，完成2.自動(dòng)進(jìn)樣器可設(shè)置其洗針，液相自動(dòng)進(jìn)樣器的洗針，只是將針內(nèi)的針沾在洗針瓶里，也就是說(shuō)，是針的外部，進(jìn)樣針是死體積的一部分。GC進(jìn)樣針洗針是由內(nèi)、外共同清洗，進(jìn)樣針不是3.液相色譜自動(dòng)進(jìn)樣器可進(jìn)行多次液體吸收。

正如其他的分析儀器一樣，如果您希望 HPLC能很好地為您提供可靠的數(shù)據(jù)，那么您首先應(yīng)該對(duì)其進(jìn)行維護(hù)，使其處于良好的待機(jī)狀態(tài)，以便您在對(duì)其操作進(jìn)行分析時(shí)，能夠比較順利地得到理想的結(jié)果。并且良好規(guī)范的操作習(xí)慣能延長(zhǎng)儀器的使用壽命。每個(gè)人上學(xué)或接受儀器公司培訓(xùn)時(shí)，老師或工程師都會(huì)提出許多操作上的注意事項(xiàng)。但是如果概括和概括一下，的有三點(diǎn)：除氣、過(guò)濾和沖洗。

被測(cè)樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個(gè)來(lái)源是試樣。有些實(shí)驗(yàn)室把樣品放入自動(dòng)采樣盤(或人工進(jìn)樣)之前，首先要經(jīng)過(guò)一個(gè)0.45μ m針筒式過(guò)濾器過(guò)濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過(guò)程要注意一點(diǎn)：你用了針筒過(guò)濾器，不可能100%獲得經(jīng)過(guò)過(guò)濾器測(cè)試的樣品，總會(huì)有或多或少的損失。損失源于以下幾個(gè)方面：過(guò)濾器過(guò)濾膜的吸附、過(guò)濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過(guò)濾器與針筒連接處的滲漏等。

如有丟失，過(guò)濾后的液體中被測(cè)物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同？這通常需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)加以證實(shí)。確定此步驟會(huì)增加工作量和成本。過(guò)濾是一種消耗，每臺(tái)過(guò)濾器的價(jià)格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時(shí)，由于底物大多比較復(fù)雜，因此過(guò)濾這一步就成為的步驟。實(shí)踐分析工作中，一般檢測(cè)每組樣品都要配外標(biāo)、加回收或質(zhì)控樣品，所以只要檢測(cè)得到的信噪比達(dá)到檢出限要求，就可以認(rèn)為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。

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移動(dòng)相中受熱，或流動(dòng)相不同組分混合將產(chǎn)生氣體，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)造成壓力波動(dòng)，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？梢栽囉靡韵路椒▉?lái)解決問(wèn)題：流動(dòng)相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩者配合使用；改系統(tǒng)外混合前進(jìn)行混合。HPLC使用的流動(dòng)相必須預(yù)先除氣，否則很容易在系統(tǒng)中漏氣，影響泵的工作。在體系中產(chǎn)生氣泡：流動(dòng)相本身存在，梯度淋洗混合后會(huì)放出氣泡；氣泡的影響：存在于管道中，系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離；存在于單向閥中，容易導(dǎo)致液體回流，流量不準(zhǔn)確，甚至不吸液存在于檢測(cè)器中，對(duì)檢測(cè)器產(chǎn)生影響。因此對(duì)液相相對(duì)流動(dòng)相的氣泡和雜質(zhì)要求比較嚴(yán)格。汽泡對(duì)柱子的分離效率有影響，檢測(cè)器的靈敏度、基線穩(wěn)定性甚至不能檢測(cè)。(噪音增加、基線不穩(wěn)定、突然跳動(dòng))。

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另外，溶解在流動(dòng)相中的氧也可以與樣品、流體相甚至固定相(如胺)反應(yīng)。溶氣還會(huì)引起溶劑 pH值的變化，給分離和分析結(jié)果帶來(lái)誤差。溶氧能與某些溶劑(例如，、四氫)形成紫外吸收絡(luò)合物，這種配合物能夠改善背景吸收(尤其是低于260 nm)，并導(dǎo)致探測(cè)靈敏度的輕微下降，但更重要的是，會(huì)造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。熒光檢測(cè)中，在一定條件下，溶解氧也會(huì)引起溶解氧，尤其是芳香烴、脂肪醛、酮等。有時(shí)，熒光反應(yīng)可降至95%以上。電化學(xué)檢測(cè)(尤其是還原電化學(xué)法)對(duì)氧的影響較大。去除流動(dòng)相中的溶解氧，將大大提高紫外檢測(cè)器的性能，并提高某些熒光檢測(cè)應(yīng)用中的靈敏度。常見的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲波、吹氦等。對(duì)于混合溶劑，采用抽氣或煮沸的方法，需考慮因溶劑揮發(fā)較低而引起的成分變化。